Dehidroelšoltcijos ketono poveikio ląstelių kultūroms tyrimas
Sauškinaitė, Evelina |
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
vicechairman | |
Komisijos sekretorius / Committee Secretary | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Šipailienė, Aušra | Komisijos narys / Committee Member |
Degutytė, Rimgailė | Komisijos narys / Committee Member |
Ragažinskienė, Ona | Komisijos narys / Committee Member |
Akramas, Laimis | Komisijos narys / Committee Member |
Šio magistro baigiamojo darbo tikslas – ištirti dehidroelšoltcijos ketono poveikį ląstelių kultūroms. Tikslui pasiekti buvo iškelti tokie uždaviniai: (1) įvertinti dehidroelšoltcijos ketono poveikį žmogaus glioblastomos ląstelių kultūros gyvybingumui, (2) įvertinti dehidroelšoltcijos ketono poveikį žmogaus pirminių imortalizuotų odos fibroblastų kultūros gyvybingumui. Tyrimai buvo atliekami su žmogaus glioblastomos ląstelių linija HROG36, kuri buvo išskirta iš smegenų navikinio audinio (CLS Cell Lines Service GmbH) bei žmogaus pirminių imortalizuotų odos fibroblastų ląstelių linija (auglio neformuojanti ląstelių kultūra). Ląstelių kultūros buvo veikiamos skirtingomis dehidroelšoltcijos ketono (DHK) koncentracijomis (25, 75, 125, 250, 375 ir 625 μg/ml) 24 val. Lygiagrečiai buvo atliekama tirpiklio dimetilsulfoksido/fosfatinio buferio druskų tirpalo (DMSO/FDB) kontrolė. Po inkubacijos su DHK glioblastomos ir odos fibroblastų ląstelių kultūrų gyvybingumas buvo vertinamas fluorimetrijos būdu su plokštelių skaitytuvu (Infinitive® 200 PRO INFINITE M PLEX by Tecan., Austrija) naudojant „Presto blueTM“ fluorescuojantį dažą. Statistinė duomenų analizė atlikta su SigmaPlot 11.0 programa. Nustatyta, kad DHK esant 75-625 μg/ml stipriai sumažina glioblastomos ląstelių gyvybingumą po 24 val. inkubacijos, o poveikis priklauso nuo DHK koncentracijos: didinant DHK koncentraciją, glioblastomos ląstelių gyvybingumas mažėja, lyginant su kontrole. Panašus DHK poveikis nustatytas ir pirminiams imortalizuotiems odos fibroblastams: DHK (125-625 μg/ml) žymiai sumažino ląstelių gyvybingumą po 24 val. inkubacijos, o didinant DHK koncentraciją, poveikis ryškėjo. Apibendrinant, dehidroelšoltcijos ketonas turį ryškų toksinį poveikį žmogaus glioblastomos (vėžinėms ląstelėms) ir odos fibroblastų ląstelių (auglio neformuojančioms) kultūroms ir mažina ląstelių gyvybingumą po 24 val. inkubacijos, o poveikis priklauso nuo dehidroelšoltcijos ketono koncentracijos.
The aim of this master thesis was to analyze the effect of dehydroelsholtzia ketone on cell cultures. To achieve this aim, the following objectives have been set: (1) to evaluate the effect of dehydroelsholtzia ketone on the viability of human glioblastoma cell culture, (2) to evaluate the effect of dehydroelsholtzia ketone on the viability of human primary immortalized skin fibroblast culture. The study was performed with the human glioblastoma cell line HROG-36, which was isolated from brain tumor tissue (CLS Cell Lines Service GmbH) and a culture of human primary immortalized skin fibroblast cells (non-tumor cell line). Cell cultures were exposed to different concentrations of dehydroelsholtzia ketone (25, 75, 125, 250, 375, and 625 μg/ml) for 24 hours. In the meantime, dimethyl sulfoxide and phosphate buffer saline solution (DMSO/FDB) as control was performed. After incubation with dehydroelsholtzia ketone, the viability of glioblastoma and skin fibroblast cell cultures was assessed fluorometrically on a plate reader (Infinitive® 200 PRO INFINITE M PLEX by Tecan., Austria) using Presto blueTM fluorescent dye. Statistical data analysis was performed by SigmaPlot 11.0 software. Results show that dehydroelsholtzia ketone at 75-625 μg/ml significantly reduces glioblastoma cell viability after 24 hours of incubation, and the effect depends on the concentration of dehydroelsholtzia ketone: by increasing the concentration of dehydroelsholtzia ketone, the viability of glioblastoma cells is strongly reduced compared to the control. A similar effect of dehydroelsholtzia ketone was observed with primary immortalized skin fibroblasts: dehydroelsholtzia ketone (125-625 μg/ml) significantly reduced cell viability after 24 hours incubation, and the effect of increasing dehydroelsholtzia ketone concentration became more pronounced. In summary, dehydroelsholtzia ketone has a marked toxic effects on human glioblastoma (cancer cells) and skin fibroblast cell cultures (tumor non-forming) and reduces cell viability after 24 hours incubation, and the effect depends on the concentration of dehydroelsholtzia ketone.