Use this url to cite ETD: https://hdl.handle.net/20.500.12512/241276
Citokinus koduojančių genų raiškos pokyčiai storosios žarnos ląstelėse po poveikio lipopolisacharidu
Type of publication
type::text::thesis::bachelor thesis
Title
Citokinus koduojančių genų raiškos pokyčiai storosios žarnos ląstelėse po poveikio lipopolisacharidu
Other Title
Changes in Cytokine-Encoding Gene Expression in Colon Cells After Exposure to Lipopolysaccharide
Author
Nerlikaitė, Gabrielė |
Advisor
Other(s)
Knyzelienė, Agnė |
Extent
48 p.
Thesis Defence Date
2024-01-17
Field of Science
Keywords (lt)
Keywords (en)
Abstract (lt)
Bakalauro baigiamojo darbo tikslas: Įvertinti lipopolischarido įtaką citokinus koduojančių genų raiškai storosios žarnos ląstelėse. Šiam tikslui įgyvendinti buvo iškelti du uždaviniai:
- Nustatyti Toll baltymo 4 receptoriaus (TLR4) geno raiškos pokyčius po 24 val. stimuliacijos 1 ir 10 μg/ml Salmonella enterica lipopolisacharido tirpalu storosios žarnos epitelinėse HCoEpic ir adenokarcinomos HCT116 ląstelėse, trijuose laiko taškuose (po 24, 48 ir 72 val.)
- Nustatyti citokinų TNF-alfa, IL-beta, IL-6, IL-10 ir IL-17A genų raiškos pokyčius storosios žarnos epitelinėse HCoEpic ir adenokarcinomos HCT116 ląstelėse po poveikio 1 ug/ml ir 10 ug/ml Salmonella enterica lipopolisacharido tirpalu, trijuose laiko taškuose (po 24, 48 ir 72 val.) Tyrimo objektas – citokinų genų raiškos pokyčiai in vitro po lipopolisacharido poveikio. Šiame darbe genų raiška buvo atlikta kiekybinio TL-PGR metodu naudojant Sybrgreen pradmenis. Atlikus genų raiškos analizę Livak metodu buvo nustatyta, kad Toll baltymo 4 receptoriaus (TLR4) geno raiška po 24 val. stimuliacijos 10 μg/ml lipopolisacharido tirpalu ląstelėse HCoEpiC padidėjo po 72 val. Citokino TNF-α geno raiška padidėjo HCT116 ląstelėse po 24 val. stimuliacijos 1 μg/ml lipopolisacharido tirpalu. IL-10 geno raiška padidėjo HCT116 ląstelėse po 24 val. stimuliacijos 1 μg/ml ir po 48 ir 72 val. stimuliacijos 10 μg/ml lipopolisacharido tirpalu, IL-17A geno raiška padidėjo HCT116 ląstelėse po 72 val. paveikus 1 μg/ml ir po 24val. ir 72 val. paveikus 10 μg/ml lipopolisacharido tirpalu, IL-6 ir IL-beta genų raiškai stimuliacija įtakos neturėjo nei 1 μg/ml nei 10 μg/ml lipopolisacharido tirpalas. Apibendrinant galima teigti, kad 24 val. stimuliacija 1 ir 10 μg/ml Salmonella enterica lipopolisacharido tirpalu buvo nepakankama, kad reikšmingai pasikeistų citokinų (TNF-alfa, IL-beta, IL-6, IL-10 ir IL-17) genų raiška storosios žarnos ląstelėse. Tačiau rezultatų patvirtinimui turi būti atlikta daugiau tyrimų.
Abstract (en)
Work was performed at: Clinical and Molecular Gastroenterology Laboratory, Digestive System Research Institute, Faculty of Medicine, Lithuanian University of Health Sciences. The aim of the thesis is to evaluate the effect of lipopolysaccharide on the expression of cytokine-encoding genes in colon cells. To achieve this aim, two objectives were set:
- To determine changes in Toll-like receptor 4 (TLR4) gene expression after 24h of stimulation with 1 and 10 μg/ml Salmonella enterica lipopolysaccharide solution in non-cancerous HCoEpic and cancerous HCT116 cells of the colon, at three time-points (after 24, 48 and 72h)
- To determine the changes in gene expression of cytokines TNF-alpha, IL-beta, IL-6, IL-10 and IL-17A in colonic epithelial HCoEpic and adenocarcinoma HCT116 cells after treatment with 1 ug/ml and 10 ug/ml Salmonella enterica lipopolysaccharide solution at three time points (24, 48 and 72 hours). The subject of the study is changes in cytokine gene expression in vitro after exposure to lipopolysaccharide. In this study, gene expression was measured by quantitative TL-PCR using Sybrgreen primers. Gene expression analysis using Livak method showed that Toll-like receptor 4 (TLR4) gene expression was increased after 72h and 24h of stimulation with 10 μg/ml lipopolysaccharide solution in HCoEpiC cells. Cytokine TNF-α gene expression was increased in HCT116 cells after 24h of stimulation with 1 μg/ml lipopolysaccharide solution. IL-10 gene expression increased in HCT116 cells after 24h of stimulation with 1 μg/ml and after 48h and 72h of stimulation with 10 μg/ml lipopolysaccharide solution, IL-17A gene expression increased in HCT116 cells after 72h of stimulation with 10 μg/ml lipopolysaccharide solution. IL-6 and IL-beta gene expression was not affected by stimulation with either 1 μg/ml or 10 μg/ml lipopolysaccharide solution. In conclusion, 24h stimulation with 1 and 10 μg/ml Salmonella enterica lipopolysaccharide solution was not sufficient to significantly alter the gene expression of cytokines (TNF-alpha, IL-beta, IL-6, IL-10 and IL-17) in colonic cells. However, more studies are needed to confirm the results.
Language
Lietuvių / Lithuanian (lt)
Defended
Taip / Yes
Access Rights
Atviroji prieiga / Open Access
File(s)