Imuninių ląstelių funkcijos koregavimas per transkripcijos faktoriaus AHR moduliaciją kasos vėžio patogenezėje

Abstract

Šio bakalaurinio tyrimo metu buvo siekiama ištirti AHR funkcinės moduliacijos poveikį PKVL priešnavikinėms funkcijoms. Tam pasiekti buvo iškelti tyrimo uždaviniai: 1) įvertinti AHR moduliacijos efektyvumą, per AHR bei CYP1A1 genų raiškos pokyčius; 2) Įvertinti moduliuotų PKVL ląstelių uždegiminius ir priešnavikinius pokyčius tiriant IL-1B, IL-4, IL-6, IL-10, PD-1 ir PDL-1 genų raišką ir sintezę. 3) Įvertinti moduliuotų PKVL ląstelių funkcinį aktyvumą, tiriant metabolinį aktyvumą, NO ir ROS produkciją. Tyrimas atliekamas išskiriant PKVL iš kasos vėžiu sergančių pacientų kraujo. Išskirtos ląstelės 24h veikiamos AHR moduliatoriais. Po moduliacijos ROS, NO bei metaboliniai pokyčiai buvo vertinami tą pačią dieną, likę PKVL mėginiai krioprezervuojami. Atlikta genų raiškos analizė iš moduliuotų PKVL: išskirta iRNR, konvertuojama į kDNR, o pokyčiai vertinami TL-PGR metodu. Iš moduliacijos terpės ELISA metodu ištirti tikslinių laisvų baltymų kiekio pokyčiai. Statistinei analizei naudotas ,,Mann-Whitney U“ testas. Rezultatai parodė CYP1A1 geno raiškos didėjimo tendenciją po AHR aktyvacijos. O inhibavus – CYP1A1 raiška mažėjo. Aktyvuoto AHR PKVL grupėje statistiškai patikimai sumažėjo IL-10 raiška, taip pat pastebėta IL-6 mažėjimo bei PD-L1 didėjimo tendencijos. Inhibuoto AHR grupėje išaugo IL-6, IL-10 bei PD-L1 raiškų tendencijos. IL-10 laisvo baltymo analizės duomenys tendencingai atkartojo IL-10 geno raiškos rezultatus. Po AHR inhibicijos, sumažėjo laisvo PD-1 ir padidėjo laisvo PD-L1 tendencijos. AHR aktyvacija skatino reikšmingą ROS produkcijos didėjimą, o AHR inhibicija – reikšmingą mažėjimą. AHR aktyvacija parodė tendencingą metabolinio aktyvumo kitimą. Vis dėlto AHR moduliacija PKVL ląstelėse buvo dalinai efektyvi. IL-6 bei IL-10 raiškos mažėjimas po AHR aktyvacijos, gali būti naudingas pacientams. AHR inhibicija slopina PD-1, bet skatina PD-L1 sintezę, ši informacija gali prisidėti prie imunoterapinių gydymo strategijų gerinimo. Po AHR aktyvacijos stebima PKVL metabolinio aktyvumo didėjimo tendencija ir reikšmingai padidėjusi ROS produkcija. Tyrimas atskleidė, kad AHR moduliacija daro poveikį PKVL genų raiškai ir metaboliniams procesams, tačiau tam, kad būtų galima išsamiai įvertinti šio kelio reikšmę imuninei sistemai ir terapiniam potencialui, būtini tolesni tyrimai su didesne imtimi ir pacientų grupavimu.