Užląstelinio užpildo mimetikų su bioaktyvumą kontroliuojančiais veiksniais kūrimas ir tyrimas

Dobrovolskis, Karolis

Use this url to cite ETD: https://hdl.handle.net/20.500.12512/111166

Užląstelinio užpildo mimetikų su bioaktyvumą kontroliuojančiais veiksniais kūrimas ir tyrimas

Type of publication

type::text::thesis::master thesis

Title

Užląstelinio užpildo mimetikų su bioaktyvumą kontroliuojančiais veiksniais kūrimas ir tyrimas

Other Title

Development and Evaluation of Extracellular Matrix Mimetics with Bioactivity Controlling Factors

Author

Dobrovolskis, Karolis

Advisor

Jekabsone, Aistė

Other(s)

Trumbeckaitė, Sonata	Recenzentas / Reviewer
Ivanauskas, Liudas	Komisijos pirmininkas / Committee Chairman
Ževžikovas, Andrejus	vicechairman
Ževžikovienė, Augusta	Komisijos sekretorius / Committee Secretary
Gudienė, Vilma	Komisijos narys / Committee Member
Savickas, Arūnas	Komisijos narys / Committee Member
Kasparavičienė, Giedrė	Komisijos narys / Committee Member
Daukšienė, Jurgita	Komisijos narys / Committee Member
Drakšienė, Gailutė	Komisijos narys / Committee Member
Kalvėnienė, Zenona	Komisijos narys / Committee Member
Majienė, Daiva	Komisijos narys / Committee Member
Radžiūnas, Raimondas	Komisijos narys / Committee Member
Stankūnienė, Aurima	Komisijos narys / Committee Member
Velžienė, Saulė	Komisijos narys / Committee Member
Skyrius, Vaidas	Komisijos narys / Committee Member
Gerbutavičienė, Rima Jūratė	Komisijos narys / Committee Member
Dagilytė, Audronė	Komisijos narys / Committee Member
Rodovičius, Hiliaras	Komisijos narys / Committee Member
Tatarūnas, Vacis	Komisijos narys / Committee Member
Lukošius, Audronis	Komisijos narys / Committee Member
Barsteigienė, Zita	Komisijos narys / Committee Member
Savickienė, Nijolė	Komisijos narys / Committee Member
Trumbeckaitė, Sonata	Komisijos narys / Committee Member
Burdulis, Deividas	Komisijos narys / Committee Member
Raudonė, Lina	Komisijos narys / Committee Member
Žilius, Modestas	Komisijos narys / Committee Member
Briedis, Vitalis	Komisijos narys / Committee Member
Kurapkienė, Vaida	Komisijos narys / Committee Member
Ramanauskienė, Kristina	Komisijos narys / Committee Member
Inkėnienė, Asta Marija	Komisijos narys / Committee Member
Minkutė, Rima	Komisijos narys / Committee Member
Vitkevičius, Konradas	Komisijos narys / Committee Member
Marksienė, Rūta	Komisijos narys / Committee Member
Kazlauskienė, Daiva	Komisijos narys / Committee Member
Kubilienė, Asta	Komisijos narys / Committee Member
Jekabsone, Aistė	Komisijos narys / Committee Member
Žvikas, Vaidotas	Komisijos narys / Committee Member
Kopustinskienė, Dalia Marija	Komisijos narys / Committee Member
Balčiūnaitė - Murzienė, Gabrielė	Komisijos narys / Committee Member
Liaudanskas, Mindaugas	Komisijos narys / Committee Member
Mazurkevičiūtė, Agnė	Komisijos narys / Committee Member
Sveikatienė, Renata	Komisijos narys / Committee Member
Šipailienė, Aušra	Komisijos narys / Committee Member
Degutytė, Rimgailė	Komisijos narys / Committee Member
Ragažinskienė, Ona	Komisijos narys / Committee Member
Akramas, Laimis	Komisijos narys / Committee Member

Extent

63 p.

Thesis Defence Date

2021-06-10

Keywords (lt)

Užląstelinis užpildas...

Sintetiniai peptidini...

Mikroglijos aktyvumas...

Extracellular matrix

Synthetic peptide hyd...

Microglial activity

Abstract (lt)

Tyrimo tikslas. Ištirti bioaktyvių peptidų regeneracinį efektyvumą smegenų ląstelių kultūrose ir parinkti jiems tinkamas hidrogelines užląstelinį užpildą atkartojančias matricas. Tyrimo uždaviniai:

Įvertinti augimo veiksnių aktyvumą atkartojančių peptidų poveikį kultivuojamų smegenų ląstelių metaboliniam aktyvumui.
Remiantis literatūros duomenimis, parinkti hidrogelines užląstelinį užpildą atkartojančias matricas, tinkamas atrinktų peptidų įvedimui. Tyrimo objektas ir metodika. Šiame darbe buvo tiriamas smegenų, glijos ir kraujagyslių endotelio augimo veiksnius imituojančių sintetinių peptidų – B-3, B-5, QK ir gliafino - bioaktyvumas. Buvo vertinama žmogaus mikroglijos ląstelių HMC-3 (ATCC® CRL-3304TM) proliferacija paveikus skirtingos koncentracijos peptidais naudojant PrestoBlue™ dažą ir matuojant jo skilimo produkto fluorescencijos intensyvumą plokštelių skaitytuvu. Tyrimo rezultatai ir išvados. Atliktas ląstelių metabolinio aktyvumo tyrimas panaudojant PrestoBlue™ dažą parodė, kad ląstelių proliferaciją statistiškai reikšmingai padidino 2,0 10,0 µmol/ml gliafinas, 0,5-0,7 µmol/ml B-3 ir 0,9 µmol/ml B-5. Peptidas QK tiriamų ląstelių proliferacijos reikšmingai nepaveikė. Galima daryti išvadą, kad kuriant hidrogelinę matricą, ląstelių proliferacijos ir metabolinės būsenos palaikymo atžvilgiu geriausiai tinka gliafinas, peptidas B-3 ir peptidas B-5. Atliktos literatūros apžvalgos duomenims, nustatyta, kad tinkamiausios natūralios medžiagos hidrogelines matricos gamybai – didelės molekulinės masės hialurono rūgštis ir alginatas. Sintetinės medžiagos pasirenkamos atsižvelgiant į matricos suirimo poreikį - poli-2-hidroksietil-metakrilatas (pHEMA) ir poli-N-2-hidroksipropil-metakrilamidas (pHPMA) nesuyrančios, polietilenglikolis (PEG) suyrantis.

Abstract (en)

Research aim. Assess regenerative effectiveness of bioactive peptides in the human brain cell cultures and select suitable hydrogel extracellular matrix mimicking matrices. Research objectives:

To assess effect of growth factors mimicking peptides on metabolic activity of cultivated human brain cells.
Based on literature analysis, to select extracellular matrix mimicking hydrogel matrices, suitable for the insertion of selected bioactive peptides. Research object and methods. In the study, bioactivity of brain derived, glial derived and vascular endothelium growth factors mimicking synthetic peptides – B-3, B-5, QK, and gliafin was investigated. Human microglial cell line HMC-3 (ATTC® CRL-3304TM) proliferation was evaluated after treatment with bioactive synthetic peptides at different concentrations using PrestoBlue™ dye and fluorimetric plate reader. Research results and conclusions. Metabolic activity assay based on PrestoBlue™ dye conversion revealed that cell proliferation improved significantly when 2,0-10,0 µmol/ml gliafin, 0,5-0,7 µmol/ml B-3 and 0,9 µmol/ml B-5 were applied. Peptide QK did not statistically significantly influence cell proliferation. Based on literature review, most suitable materials for synthesis of hydrogel matrix are high molecular weight hyaluronic acid and alginate. The choice of synthetic materials depends on the need for biodegradability; poly-2-hidroxyethyl-methacrylate (pHEMA) and poli-N-2-hidroxypropyl-methacrylamide (pHPMA) are the most suitable non-biodegradable, while polyethylenglycole (PEG) is the most suitable biodegradable material.