Kvapiųjų rozmarinų (Rosmarinus officinalis L.) lapų skystųjų ekstraktų priešvėžinio aktyvumo įvertinimas

Tikslas: Įvertinti kvapiųjų rozmarinų lapų skystųjų ekstraktų priešvėžinį aktyvumą. Darbo uždaviniai: 1) Ištirti įvairiomis sąlygomis pagamintų kvapiųjų rozmarinų skystųjų ekstraktų poveikį vėžio ląstelių proliferacijai ir migracijai; 2) Nustatyti kvapiųjų rozmarinų skystųjų ekstraktų veikliųjų medžiagų – rozmarino rūgšties, ursolo rūgšties, oleanolio rūgšties ir karnozolio – priešvėžinį aktyvumą; 3) Įvertinti ekstraktų priešvėžinio aktyvumo priklausomybę nuo jų sudėtyje esančių pagrindinių veikliųjų medžiagų kiekio. Tyrimo objektas: Kvapiųjų rozmarinų (Rosmarinus officinalis L.) džiovintų lapų vandeniniai ir etanoliniai ekstraktai. Tyrimo metodai. Poveikis žmogaus vėžio ląstelių proliferacijai įvertintas tiriant ląstelių gyvybingumo slopinimą MTT metodu. Poveikis ląstelių migracijai in vitro nustatytas, panaudojant „žaizdos gijimo“ metodą. Koreliacija tarp ekstraktų veikliųjų komponentų aktyvumo ir ekstraktų aktyvumo įvertinta apskaičiuojant Pearson‘o koreliacijos koeficientą r. Rezultatai. Iš keturiolikos tirtų rozmarinų lapų skystųjų vandeninių ir etanolinių ekstraktų, devyni veikė bent vieną vėžinių ląstelių liniją mažesne nei 5 mg/ml koncentracija. Jie geriausiai veikė IGR39 ląstelių liniją, mažiausiai – U87. Iš vandeninių ekstraktų didžiausiu aktyvumu pasižymėjo ekstraktai R1, R2 ir R7, jie visas ląstelių linijas veikė 8 mg/ml ir mažesnėmis koncentracijomis. Iš etanolinių ekstraktų didžiausiu priešvėžiniu aktyvumu pasižymėjo ekstraktai R10, R11, R12, R13, jų priešvėžinis aktyvumas (GI50) A549, IGR39 ir U87 ląstelėms yra 2,3–5,5 mg/ml. Didžiausią priešvėžinį aktyvumą turi ursolo rūgštis, kurios GI50 visoms tirtoms ląstelių linijoms yra 10,1–13,2 µM. Oleanolio rūgštis ir ursolo rūgštis A549 ir IGR39 ląstelių migraciją slopino 25,0–50,0 µM koncentracijomis. Iš keturių tirtų rozmarino ekstraktų, ekstraktas R1 turėjo stipriausią A549 ir IRG39 ląstelių migraciją slopinantį poveikį. Priešvėžiniam ekstraktų aktyvumui daugiausiai įtakos galėtų turėti oleanolio ir rozmarino rūgštys. Išvados: Kvapiųjų rozmarinų lapų skystieji vandeniniai ir etanoliniai ekstraktai pasižymi priešvėžiniu aktyvumu žmogaus melanomos, plaučių karcinomos ir glioblastomos ląstelėms: slopina jų proliferaciją ir migraciją. Dauguma ekstraktų aktyvesni prieš melanomos ląsteles, mažiausiai veikia glioblastomos ląstelių proliferaciją.

The Aim of the Research: To evaluate anticancer activity of the rosemary leaf liquid extracts. Objectives: 1) To investigate the antiproliferative and antimigratory activities of rosemary leaf liquid extracts produced under different conditions; 2) To investigate anticancer activity of the active ingredients found in extracts (ursolic acid, rosemary acid, oleanolic acid, and carnosol); 3) To evaluate the correlation between the quantity of main active substances of extracts and the anticancer activity of extracts. The object of research: Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) dried leaf ethanolic and aqueous extracts. Methods. The effect on human cancer cell proliferation was investigated by evaluating cell viability using MTT assay. Antimigratory activity was tested in vitro using “wound healing” method. The correlation between anticancer activity of extracts and concentration of the main active ingredients was evaluated by calculating Pearson's correlation coefficient r. Results. Nine out of fourteen tested Rosemary leaf liquid aqueous and ethanolic extracts inhibited the growth of at least one cancer cell line at concentration lower than 5 mg/ml. Extracts possessed the highest activity against IGR39 cell line, and the lowest against U87. In the group of aqueous extracts R1, R2 and R7 were the most active ones against all tested cancer cell lines at the concentration of 8 mg/mL or lower. In series of ethanolic extracts the most active were R10, R11, R12, R13. Their anticancer activity (GI50) against A549, U87 and IGR39 cells was in the range of 2.3 5.5 mg/mL. Ursolic acid showed the highest anticancer activity against all tested cancer cells (GI50 was from 10.1 to 13.2 µM). Oleanolic acid and ursolic acid inhibited A549 and IGR39 cell migration at the concentrations from 25.0 to 50.0 µM. Rosemary extract R1 had the higher antimigratory activity on IRG39 and A549 cells. Anticancer activity of extracts was mostly dependent on the amounts of ursolic acid and oleanolic acid. Conclusions. Rosemary leaf liquid aqueous and etanolic extracts have anticancer activity against melanoma, lung carcinoma, and glioblastoma cells: inhibit their proliferation and migration. Majority of tested extracts were more active against melanoma cells, the activity on glioblastoma cell proliferation was lower.