Kasos vėžinių ląstelių gyvybingumo vertinimas veikiant jas chemoterapiniu vaistu gemcitabinu ir gauromečio (Chamerion angustifolium L.) ekstraktu

Darbo tikslas: Įvertinti gemcitabino, gauromečio ekstrakto bei jų kombinacijų poveikį kasos vežinių ląstelių metabolizmui ir proliferacijai, in vitro. Darbo uždaviniai:

1. Įvertinti gemcitabino poveikį vėžio ląstelių metabolizmui bei proliferacijai;
2. Įvertinti gauromečio ekstrakto poveikį kasos vežio ląstelių metabolizmui bei proliferacijai;
3. Įvertinti skirtingų gemcitabino ir gauromečio ekstrakto kombinacijų poveikį kasos vėžio ląstelėms bei jų kombinacinį efektyvumą. Tyrimo objektas: Iš ATCC gautos žmogaus kasos latakų epitelinės adenocarcinomos ląstelių linija MIA PaCa-2. Metodika: Kasos vėžinės ląstelės buvo veikiamos skirtingų koncentracijų gemcitabino tirpalu, gauromečio ekstraktu ir jų skirtingų koncentracijų kombinacijomis. Inkubacinis periodas bei laikymo salygos : 24 valandos ir 37°C, 5 proc CO2. Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT metodu. Lastelių proliferaciją/kolonijų susidarymas buvo įvertinta naudojant šešių šulinėlių plokšteles ir vertinant pagal turimas kontrolines vertes. Rezultatai: Nustatyta gemcitabino (1040nM) ir siauralapio gauromečio (1.16mg/ml) koncentracija kuri slopina kasos vežinių ląstelių gyvybingumą 50 proc. Vertinant ilgalaikį nustatytų dozių poveikį ląstelių kolonijų formavimui, nustatyta, kad tiek gemcitabinas, tiek gaurometis ląsteles veikia citotoksiškai, šis efektas ilgalaikis ir negryžtamas. Tuo tarpu, kombinuotas gauromečio ir gemcitabino poveikis neturi reikšmingų rezultatų kasos vėžinių ląstelių gyvybingumui, lyginant su pavieniais veikliųjų medžiagų poveikiais. Išvados: Galima teigti, kad gemcitabinas ir siauralapis gaurometis neturi reikšmingo kombinuoto poveikio žmogaus kasos latakų epitelinės adenocarcinomos ląstelių linijai MIA PaCa-2. Tačiau, pavieniai gemcitabino ir siauralapio gauromečio poveikiai pasižymi stipriu ląstelių gyvybingumo ir ląstelių proliferacijos slopinimu.

Aim of the study: To assess the effect of Gemcitabine, Fireweed (Chamerion angustifolium L.) extract and their combinations on the metabolism and proliferation of pancreatic cancer cells, in vitro. The task of the study:

1. To assess the effect of Gemcitabine on the metabolism and proliferation of pancreatic cancer cells;
2. To assess the effect of Fireweed (Chamerion angustifolium L.) extract on the metabolism and proliferation of pancreatic cancer cells;
3. To assess the effects of different combinations of Gemcitabine and Fireweed (Chamerion angustifolium L.) extract on pancreatic cancer cells and their combined effectiveness. The object of the study: Human pancreatic ductal epithelial adenocarcinoma cell line MIA PaCa-2 obtained from ATCC. Methods: Pancreatic cancer cells were exposed to different concentrations of Gemcitabine solution, Fireweed (Chamerion angustifolium L.) extract and combinations of their different concentrations. Incubation period and storage conditions: 24 hours and 37°C, 5 % CO2 . Cell viability was assessed and measured using MTT method. Cell proliferation was assessed using six-well plates and compared with available control group. Results: Determened the concentrations of Gemcitabine (1040nM) and Fireweed (1.16 mg/ml) (Chamerion angustifolium L.) which inhibit cell viability 50 percent. When assessing the long-term effects of the used doses on formation of cell colonies, it was found that both gemcitabine and fireweed have a cytotoxic effect on cells, this effect turned out to be long-lasting and irreversible. Meanwhile, Gemcitabine and Fireweed does not have a significant combined effect on pancreatic cancer cell viability but does exhibit a strong independent effects on viability and inhibition of cell proliferation. Conclusions: Collectively, this data suggests that Gemcitabine and Fireweed does not have a significant combined effect on human pancreatic ductal epithelial adenocarcinoma cell viability but does exhibit a strong independent effect on viability and inhibition of cell proliferation.