Kuilių spermos kokybės kitimas skirtingomis jos laikymo sąlygomis
Paškevičius, Tomas |
Recenzentas / Reviewer | |
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos sekretorius / Committee Secretary | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member |
Šio darbo tikslas buvo nustatyti temperatūros įtaką spermatozoidų gyvybingumo, judrumo ir pH kitimui per 72 valandas, įvertinti patologinius spermatozoidus bei apskaičiuoti jų koncentraciją. Tyrimas atliktas 2017 metais LSMU VA Gyvūnų reprodukcijos laboratorijoje. Numatytiems tyrimams atlikti iš kuilių spermos gamybos įmonės gauta 50 šviežios skiestos kuilių spermos dozių. Atlikus pradinius tyrimus (nustačius pradinį judrumą, gyvybingumą, pH, įvertinus spermatozoidų koncentraciją ir morfologinius pakitimus) mėginys buvo padalintas į tris dalis ir 72 val. inkubuotas skirtingose temperatūrose: 16 ± 0,5oC; 4 ± 0,5oC ir 25 ± 0,5oC. Spermatozoidų judrumo, pH ir gyvybingumo tyrimai kiekviename skirtinguose temperatūriniuose režimuose inkubuotame mėginyje buvo atlikti dar du kartus: po 6 val. ir po 72 val. Spermatozoidų judrumas buvo nustatomas subjektyviai (mikroskopuojant) ir objektyviai (kompiuterine spermos judrumo vertinimo programa SCA). Spermatozoidų gyvybingumui įvertinti buvo naudoti eozino - nigrozino dažai. H jonų koncentracija skiestoje kuilių spermos dozėje buvo nustatoma elektroniniu pH-matuokliu. Didžiausias spermatozoidų judrumas po 72 val. nustatytas mėginiuose, inkubuotuose kontrolinėje 16oC temperatūroje, tiek mikroskopuojant (67,30 ± 1,13 proc.; p < 0,05), tiek SCA programa (88,02 ± 1,44 proc.; p > 0,05). Didžiausias spermatozoidų gyvybingumas po 72 val. taip pat išliko mėginiuose, inkubuotuose kontrolinėje 16oC temperatūroje (78,3 ± 2,17 proc.; p > 0,05). Spermos pH po 72 val. labiausiai pakito mėginiuose, inkubuotuose 4oC temperatūroje, ir siekė 7,4 ± 0,01. Nustatytas statistiškai patikimas stiprus koreliacinis ryšys tarp atskirų spermatozoidų judrumo, gyvybingumo ir pH parametrų (p < 0,05).
The aim of this thesis was to determine the effect of temperature on changes in viability, mobility and pH of spermatozoa over 72-hour period. To evaluate pathological spermatozoa and calculate their concentration. The study was conducted in 2017 in LSMU VA Animal Reproduction Laboratory. The intended study involved 50 doses of fresh diluted boar sperm obtained from boar sperm production company. After initial studies (determination of initial mobility, vitality, pH, evaluation of spermatozoa concentration and morphological changes), the sample was divided into three parts and incubated at different temperatures: 16 ± 0,5 oC; 4 ± 0,5 oC and 25 ± 0,5 oC 72 hours. Investigations of sperm motility, pH, and vitality in each sample, incubated in different temperature regimes, were performed twice more: after 6 and 72 hours. The sperm motility was determined subjectively (by microscopy) and objectively (computerized sperm motility analysis SCA). Sperm viability assessment was carried out using Eosin – Nigrosin staining technique. H ion concentration in the diluted boar sperm dose was determined by an electronic pH meter. Maximum sperm mobility after 72 hours was determined in samples incubated at a control temperature of 16oC both by using microscopy (67,30 ± 1.13 %; p < 0,05) and SCA program (88,02 ± 1.44 %; p > 0,05). Maximum sperm viability after 72 hours also remained in samples incubated at a control temperature of 16oC (78,3 ± 2.17 %; p > 0,05). The highest change in sperm pH after 72 hours was found in samples incubated at 4°C and reached 7,4 ± 0,01. A statistically reliable correlation between individual sperm mobility, viability and pH parameters was established