Laisvųjų amino rūgščių kiekybinis įvertinimas Lietuvoje auginamų pluoštinių kanapių (Cannabis sativa L.) sėklose dujų chromatografijos metodu

Darbo tikslas: Kiekybiškai ištirti ir įvertinti Lietuvoje kultivuojamų pluoštinių kanapių (Cannabis sativa L.) sėklose esančias laisvąsias amino rūgštis. Uždaviniai: remiantis moksliniais straipsniais parengti literatūros apžvalgą; paruošti surinktas pluoštinių kanapių (Cannabis sativa L.) sėklas eksperimentiniams tyrimams, atlikti mėginių ekstrakciją pritaikant derivatizacijos metodą.; dujų chromatografijos analizės metodu identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti laisvąsias amino rūgštis; palyginti gautus laisvųjų amino rūgščių kiekius kepintose ir žaliose pluoštinių kanapių sėklose. Tyrimo objektas: tyrime buvo analizuojamos 6 skirtingos pluoštinių kanapių (Cannabis sativa L.) sėklų veislės, ARG B1 – Finola veislė, surinkta Panevėžio raj., ARG B2 – Futura 75 veislė, surinkta Anykščių raj., ARG B3 – Futura 75 veislė, surinkta Marijampolės raj., ARG W1 – Futura 75 veislė, surinkta Rokiškio raj., Panemunėlio m., ARG W2 – Finola veislė, surinkta Anykščių raj., ARG W3 – Finola veislė, surinkta Kupiškio raj. Vykdant tyrimą su žaliomis sėklomis, buvo nuspręsta tas pačias sėklų veisles pakepinti ir palyginti tarpusavyje gautus rezultatus. Rezultatai: tiriamuosiuose mėginiuose dujų chromatografijos/masių spektrometrijos metodu buvo identifikuota 14-15 laisvųjų amino rūgščių: L-alaninas, L-glicinas, L-valinas, L-leucinas, Lizoleucinas, L-prolinas, L-metioninas, L-serinas, L-treoninas, L-fenilalaninas, L-aspartamo rūgštis, Lglutamatas, L-lizinas, L-tirozinas ir L-cistinas. Didžiausi bendri nepakeičiamų amino rūgščių kiekiai buvo aptikti kepintose (18,103µg/ml) ir žaliose (17,851µg/ml) Futura 75 veislės, surinktos Rokiškio raj., Panemunėlio m., sėklose, mažiausi kiekiai nustatyti Finola veislės, surinktos Anykščių raj. sėklose: kepintose (16,69µg/ml), o žaliose (16,224µg/ml). Didesnės bendros pakeičiamų amino rūgščių koncentracijos aptiktos kepintose sėklose, dėl gautos L-cistino amino rūgšties, kurios žaliose sėklose nebuvo aptikta. Didžiausi šių amino rūgščių kiekiai nustatyti Futura 75 veislės, surinktos Rokiškio raj., Panemunėlio m. sėklose: kepintose (19,916µg/ml), o žaliose (12,827µg/ml). Tiriant bendrą visų amino rūgščių kiekį, buvo pastebėta, jog didesni kiekiai nustatyti mėginiuose, kuriuose buvo tirtos žalios sėklos, iš jų didžiausias kiekis nustatytas Futura 75 veislės, surinktos Rokiškio raj., Panemunėlio m. sėklose (30,678µg/ml), o mažiausias kiekis aptiktas Futura 75 veislės, surinktos Anykščių raj. sėklose (23,719µg/ml). Kepintose sėklose taip pat didžiausias kiekis nustatytas Futura 75 veislės, surinktos Rokiškio raj., Panemunėlio m. sėklose (25,195µg/ml), o mažiausias – Futura 75 veislės, surinktos Anykščių raj. sėklose (21,69µg/ml).

The aim of this research is to analyze the quantitative composition of free amino acids found in the seeds of varieties of industrial hemp (Cannabis sativa L.) cultivated in Lithuania. The objectives of the research: analise literature sources and prepare literature review; collect seeds of the industrial hemp (Cannabis sativa L.) and prepare samples for extraction with derivatization; to select optimal conditions for quantitative analysis of free amino acids; using the gas chromatography method, to identify and qualitatively evaluate free amino acids content; to determine and compare the amount of free amino acids in different variety of industrial hemp (Cannabis sativa L.) seeds. The object of the research was 6 different seeds varieties of industrial hemp (Cannabis sativa L.), ARG B1 – Finola variety, collected in Panevėžio raj., ARG B2 – Futura 75 variety, gathered in Anykščių raj., ARG B3 – Futura 75 variety, gathered in Marijampolės raj., ARG W1 – Futura 75 variety, collected in Rokiškio raj., Panemunėlio m., ARG W2 – Finola variety, gathered in Anykščių raj., ARG W3 – Finola variety, collected in Kupiškio raj. In the research with raw seeds was decided to do the same research with roasted same varieties of seeds. The results of the research: L-alanine, L-glycine, L-valine, L-leucine, L-isoleucine, L-proline, L-methionine, L-serine, L-threonine, L-phenylalanine, L-aspartame, L-glutamate, L-lysine, L-tyrosine and L-cystine have been identified by the gas chromatography method in comparison of retention times according to the standards. The highest amount of essential amino acids was found in roasted (18,103μg/ml) and in raw (17,851μg/ml) Futura 75 variety, which was collected in Rokiškio raj. seeds, the smallest quantities were found in Finola variety, which was gathered in Anykščių raj. seeds: roasted (16,69μg/ml) , and in raw (16.224μg/ml). Larger amount of non-essential amino acids were found in roasted seeds, due to the L-cystine, which were not found in raw seeds. The highest amount of these amino acids are found in Futura 75 variety, which was collected in Rokiškio raj., Panemunėlio m. seeds: roasted (19,916μg/ml) and raw (12,827μg/ml). Larger a total amount of all amino acids was found in samples with raw seeds, of which the highest content was found in Futura 75 variety, which was collected in Rokiškio raj., Panemunėlio m. seeds (30,678μg/ml) and the lowest amount was detected in Futura 75 variety, which was gathered in Anykščių raj. seeds (23,719μg/ml). In the roasted seeds, the highest amount were also found in Futura 75 variety, which was collected in Rokiškio raj., Panemunėlio m. seeds (25,195μg/ml) and the lowest in Futura 75 variety, which was gathered in Anykščių raj. seeds (21.69μg/ml).