Hepatitu C sergančių asmenų hematologinių, biocheminių ir krešėjimo tyrimų rezultatų analizė

Darbo tikslas: įvertinti Kauno klinikose tirtų asmenų dėl hepatito C biocheminius, bendro hematologinio ir krešėjimo tyrimų duomenis pagal lytį ir viremijos dydį. Darbo uždaviniai: 1. Palyginti teigiamų hepatito C antikūnų ir hepatito C viruso kopijų skaičiaus kraujyje rezultatus lyčių bei amžiaus atžvilgiu; 2. Nustatyti biocheminių, bendro hematologinio ir krešėjimo tyrimų rezultatų skirtumus tarp skirtingų lyčių ir viremijos dydžio; 3. Palyginti hepatitu C sergančių asmenų biocheminių, bendro hematologinio tyrimo ir krešėjimo tyrimų rezultatus prieš ir po gydymo. Tyrimo objektas ir metodai: atlikta LSMU Ligoninės Kauno klinikų Laboratorinės Medicinos klinikoje nuo 2023-05-01 iki 2024-05-01 pacientų, kuriems tyrimais patvirtinti anti-HCV, viremija ir hepatito C genotipai demografinių bei biocheminių, bendro hematologinio ir krešėjimo tyrimų retrospektyvinė duomenų analizė. Anti-HCV nustatytas netiesioginės ELISA metodu, naudojant automatinį imunologinį analizatorių ETI-MAX 3000 (DiaSorin S.p.A., Saluggia, Italija) bei Murex anti-HCV (version 4.0) (DiaSorin S.p.A., Saluggia, Italija) reagentų rinkinį. HCV kopijų skaičius nustatytas naudojant tikro laiko kiekybinį polimerazės grandinės reakcijos metodą, naudojant sistemą Rotor-Gene® Q MDx 5plex HRM (QIAGEN GmbH, Hildenas, Vokietija). Hepatito C genotipų nustatymui naudotas VERSANT® HCV genotipo 2.0 tyrimo rinkinys (Fujirebio Europe N.V., Gentas, Belgija). Bendro hematologinio tyrimo rodikliams nustatyti naudota automatizuota hematologinė sistema UniCel DxH 800 (Beckman Coulter, Chaska, JAV). Biocheminiams ir imunologiniams rodikliams nustatyti naudotos automatizuotos biocheminių ir imunologinių tyrimų sistemos AU680 (Beckman Coulter, Brea, JAV) ir TOSOH AIA-900 (Tosoh Corporation, Yokkaichi, Japonija). Krešėjimo analitėms nustatyti naudota automatizuota krešėjimo tyrimų sistema Stago STAR Max (Diagnostica Stago, Taverny, Prancūzija). Statistinė duomenų analizė atlikta kompiuterine programa IBM SPSS Statistics 30.0.0.0 (IBM Corporation, JAV). Tyrimo rezultatai: į tyrimą įtraukti viso 367 tiriamieji, turėję teigiamą anti-HCV, HCV RNR rezultatą bei nustatytą genotipą, iš kurių 60,8 proc. sudarė vyrai ir 39,2 proc. moterys. Bendras populiacijos amžiaus vidurkis 55,2 ± 13,8 metai. Remiantis Lietuvos respublikos sveikatos ministro įsakymu [1], tiriamieji pagal HCV RNR kopijų skaičių ir lytį buvo suskirstyti į 4 tiriamąsias grupes: aukšta viremija vyrai, aukšta viremija moterys, žema viremija vyrai ir žema viremija moterys. Vyriausios buvo aukštos viremijos moterys – 58,32 ± 10,63, o jauniausi aukštos viremijos vyrai – 53,48 ± 10,29 metai (p = 0,001). Dažniausias nustatytas genotipas visose tiriamosiose grupėse buvo 1b (42,23 proc.). Atlikta biocheminių, bendro hematologinio ir krešėjimo tyrimų rezultatų analizė tarp tiriamųjų grupių prieš ir po gydymo. Tyrimo metu nustatyta, kad aktyvus HCV daugiausiai paveikė RBC, HGB, HCT, PT (s), PT (proc.), INR, ALP, GGT ir AST rodiklių rezultatus. Analizės prieš gydymą metu nustatyta, kad reikšmingiausi skirtumai tarp grupių gauti vertinant RBC (p < 0,001), HCT (p = 0,009), HGB (p = 0,034), PT (s) (p = 0,003), PT (proc.) (p < 0,001), INR (p = 0,002), ALP (p = 0,023), GGT (p = 0,002) ir AST (p = 0,006) analites. Analizė po gydymo parodė teigiamą gydymo įtaką atsistatant į normalias fiziologines vertes daugumai tirtų rodiklių. Išvados:

1. Palyginus HCV antikūnų ir viruso kiekio rezultatus pagal lytį ir amžių, nustatyta, kad tiek aukštos, tiek žemos viremijos grupėse dominavo vyrai. Statistiškai reikšmingi amžiaus skirtumai tarp grupių parodė, kad aukštos viremijos moterų grupė buvo vyriausia, o aukštos viremijos vyrų grupė – jauniausia. Tai leidžia daryti prielaidą apie galimus amžiaus ir lyties sąlygotus skirtumus viruso progresijoje ar diagnostikoje.
2. Nustatyta, kad laboratorinių tyrimų rezultatai skyrėsi tarp lyties ir viremijos lygio grupių. Vyrų grupėms, ypač sergantiems aukšta viremija, būdingi reikšmingi biocheminiai (padidėję AST, GGT, ALP), hematologiniai (sumažėję RBC, HGB, HCT) ir krešėjimo (PT, INR) pokyčiai. Moterų grupėms labiau būdingas AST, ALT padidėjimas bei padidėjęs limfocitų procentas, o žemos viremijos moterims – dažnesni bilirubino padidėjimai.
3. Įvertinus laboratorinių rodiklių pokyčius po gydymo, visose grupėse stebėta parametrų normalizacija. Moterų grupėse po gydymo ryškiai sumažėjo AST ir ALT reikšmės, tuo tarpu vyrams labiausiai kito eritropoezės ir krešėjimo sistemos rodikliai. Žemos viremijos vyrams, nepaisant gydymo, išliko sumažėję RBC, HGB ir HCT, kas gali rodyti ilgalaikį viruso ar gydymo poveikį kraujodarai.
4. Lyginant rodiklių pokyčius tarp grupių, nustatyta, kad vyrų grupėse labiausiai kito eritropoezės ir krešėjimo parametrai, o moterų – kepenų fermentų aktyvumas bei imunologiniai žymenys (pvz., limfocitų kiekis). Tai patvirtina būtinybę vertinti lytį ir viremijos lygį kaip svarbius veiksnius nustatant infekcijos poveikį organizmui.

The aim of the study: To evaluate the biochemical, general hematological, and coagulation test results of individuals tested for hepatitis C at Kaunas Clinics, based on gender and viral load level. The objectives: 1. To compare the results of hepatitis C antibody positivity and HCV RNA viral load in blood by gender and age; 2. To determine differences in biochemical, general hematological, and coagulation test results between genders and different levels of viremia; 3. To compare biochemical, general hematological, and coagulation test results in individuals with hepatitis C before and after treatment. Research object and methods: A retrospective data analysis was conducted of patients tested at the Laboratory Medicine Clinic of the Hospital of Lithuanian University of Health Sciences Kaunas Clinics from 2023-05-01 to 2024-05-01. The analysis included individuals with confirmed anti-HCV antibodies, HCV viremia, and hepatitis C genotypes. Anti-HCV antibodies were detected using an indirect ELISA method with the ETI-MAX 3000 automated immunoassay analyzer (DiaSorin S.p.A., Saluggia, Italy) and the Murex anti-HCV (version 4.0) reagent kit (DiaSorin S.p.A., Saluggia Italy). Hepatitis C viral load was determined using a quantitative real-time PCR method with the Rotor-Gene® Q MDx 5plex HRM system (QIAGEN GmbH, Hilden, Germany). Hepatitis C genotyping was performed using the VERSANT® HCV Genotype 2.0 assay (Fujirebio Europe N.V., Ghent, Belgium). General hematological parameters were measured using the UniCel DxH 800 automated hematology system (Beckman Coulter, Chaska, USA). Biochemical and immunological parameters were determined using AU680 (Beckman Coulter, Brea, USA) and TOSOH AIA-900 (Tosoh Corporation, Yokkaichi , Japan) automated analyzers. Coagulation parameters were assessed using the Stago STAR Max automated coagulation analyzer (Diagnostica Stago, Taverny, France). Statistical data analysis was conducted using IBM SPSS Statistics 30.0.0.0 (IBM Corporation, USA). Results: A total of 367 participants with positive anti-HCV, detectable HCV RNA, and identified genotype were included in the study, of whom 60.8% were men and 39.2% women. The mean age of the population was 55.2 ± 13.8 years. According to the order of the Minister of Health of the Republic of Lithuania [1], the subjects were divided into four study groups based on HCV RNA viral load and gender: high viremia men, high viremia women, low viremia men, and low viremia women. The oldest group was high viremia women (mean age 58.32 ± 10.63), and the youngest group was high viremia men (mean age 53.48 ± 10.29, p = 0.001). The most common genotype in all study groups was 1b (42.23%). An analysis of biochemical, hematological, and coagulation parameters was performed before and after treatment across the study groups. The study found that active HCV infection most significantly affected RBC, HGB, HCT, PT (s), PT (%), INR, ALP, GGT, and AST levels. Before treatment, the most significant intergroup differences were observed in RBC (p < 0.001), HCT (p = 0.009), HGB (p = 0.034), PT (s) (p = 0.003), PT (%) (p < 0.001), INR (p = 0.002), ALP (p = 0.023), GGT (p = 0.002), and AST (p = 0.006). Post-treatment analysis showed a positive effect of therapy, with most tested parameters returning to normal physiological values. Conclusions:

1. A comparison of HCV antibody and viral load results by gender and age revealed that men predominated in both high and low viremia groups. Statistically significant age differences between the groups showed that women with high viremia were the oldest, while men with high viremia were the youngest. This suggests potential age- and sex-related differences in viral progression or diagnostics.
2. Laboratory test results differed between groups based on gender and viremia level. Male groups, particularly those with high viremia, exhibited significant biochemical (elevated AST, GGT, ALP), hematological (reduced RBC, HGB, HCT), and coagulation (PT, INR) changes. In female groups, elevated AST and ALT levels and a higher lymphocyte percentage were more common, while elevated bilirubin levels were more frequently observed in women with low viremia.
3. After treatment, normalization of laboratory parameters was observed in all groups. In females, AST and ALT levels significantly decreased post-treatment, whereas in males, the most notable changes were seen in erythropoiesis and coagulation parameters. In men with low viremia, reduced RBC, HGB, and HCT levels persisted despite treatment, potentially indicating a long-term impact of the virus or treatment on hematopoiesis.
4. When comparing parameter changes between groups, the most pronounced shifts in males were observed in erythropoiesis and coagulation markers, while in females, liver enzyme activity and immunological markers (e.g., lymphocyte count) were more affected. These findings support the importance of considering sex and viremia level as key factors when assessing the impact of infection on the body.