Staphylococcus aureus paplitimas galvijų bandose ir šių bakterijų enterotoksinų ir atsparumo antimikrobinėms medžiagoms nustatymas
Recenzentas / Reviewer | |
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
Komisijos sekretorius / Committee Secretary | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member |
Šio tyrimo tikslas buvo nustatyti S. aureus paplitimą pieninių galvijų ūkių aplinkoje dviem skirtingais laikotarpiais - šaltuoju ir šiltuoju laikotarpiu bei ištirti bakterijų gaminamus enterotoksinus ir atsparumą antimikrobinėms medžiagoms. Iš viso tirta 120 aplinkos paviršiaus nuoplovų mėginių, kurie buvo paimti iš pieninių galvijų ūkių aplinkos: guoliaviečių, šėrimo takų, melžimo įrangos ir veršelių gardų. Taip pat buvo paimta 18 pieno mėginių iš ūkių pieno cisternų. S. aureus bakterijoms išskirti ir identifikuoti buvo naudojama manitolio terpė (Biolife, Italija), laisvosios ir surištosios koaguliazės testai (Jungtinė Karalystė), PGR reakcija nustatant specifinį NucA geną. PGR patvirtintiems S. aureus izoliatams sekančiame tyrimo etape taip pat PGR metodu buvo įvertinti SEA, SEC, SED ir SEG entorotoksinų gamyba bei atliktas atsparumo antimikrobinėms medžiagoms (amoksicilinui, tetraciklinui, ceftriaksonui, streptomicinui ir ciprofloksacinui), tyrimas naudojant E - testą (Liofilchelm, Italija). Atsparumo antimikrobinėms medžiagoms tyrimo rezultatai buvo įvertinti pagal EUCAST 2021 m. ir CLSI 2020 m. vertinimo rekomendacijas. Gauti duomenys analizuoti Microsoft Office Excel 2010 programa ir SPSS statistinių duomenų paketu. Viso tyrimo metu buvo išskirti ir PGR patvirtinti 25 S. aureus bakterijų izoliatai iš 86 klasikiniais metodais išskirtų Staphylococcus spp. izoliatų. S. aureus buvo išskirti iš 16,67 proc. (20 iš 120) pieninių galvijų ūkių aplinkos paviršiaus nuoplovų mėginių ir 27,78 proc. (5 iš 18) pieno mėginių. S. aureus dažniau buvo išskirto šaltuoju laikotarpiu 23,33 proc. nuoplovų mėginių lyginant su šiltuoju laikotarpiu - 10 proc. nuoplovų mėginių. Kitos PGR reakcijos metu, įvertinus S. aureus izoliatų (n = 25) entrotoksinų gamybą, nustatyta, kad 60 proc.(n = 15) S. aureus izoliatų gamino enterotoksinus. S. aureus dažniausiai gaminо SEC toksiną – 8 S. aureus izoliatai (53,33 proc.). SEA ir SEG toksinus gamino po 6 S. aureus izoliatus (po 40 proc.). Rečiausiai buvo nustatytas S. aureus toksinas SED – 4 (26,67 proc.). Nustatėme, kad 40 proc. S. aureus izoliatų gamino daugiau nei vieną enterotoksiną. Antimikrobinio jautrumo tyrimas parodė, kad visos S. aureus padermės buvo jautrios amoksicilinui ir ceftriaksonui. Iš viso 20 proc. padermių buvo atsparios tetraciklinui ir ciprofloksacinui. Nustatėme, kad 16 proc. S. aureus padermių buvo atsparios streptomicinui
The purpose of this study was to determine the prevalence of S. aureus in the environment of cattle farms and to investigate the production of enterotoxins and antimicrobial resistance of isolated bacteria. Samples were collected at three farms, in two different periods – in the cold and warm periods. In total 120 environment swab samples were collected from the dairy farm environment: from calves and cattle beddings area, feeding sites and milking equipment surfaces. Additionaly,18 milk samples were also taken from the farms milk tanks. S. aureus was isolated based on Mannitol salt (Biolife, Italy), free and bound coagulase tests (United Kingdom), and PCR reaction assessing the NucA gene. PCR method was also used to detect SEA, SEC, SED and SEG enterotoxins of S. aureus. At the final step S. aureus isolates were tested on antimicrobial resistance to amoxicillin, tetracycline, ciprofloxacin, streptomycin and ceftriaxone using E – test (Liofilcheml, Italy). The results of the antimicrobial resistance were evaluated on the basis of EUCAST 2021 and CLSI 2020 guidelines. The obtained data was analyzed using statistical Microsoft Office Excel 2010 program and SPSS statistical package. In total 25 S. aureus isolates were confirmed with PCR out of 86 Staphylococcus spp. detected. S. aureus was isolated from 16.67% (20 of 120) of environmental swab samples of dairy cattle farms and 27.78% (5 of 18) of milk samples. S. aureus was more often detected in the cold period collected samples (23.33%) in comparison to warm period collected samples (10%). Based on PCR results in total 60% (n = 15) of isolated S. aureus produced enterotoxins. S. aureus SEC enterotoxin was produced most often – 8 S. aureus isolates (53.33%.). SEA and SEG enterotoxins were produced by 6 S. aureus isolates each (40%), meanwhile, SED enterotoxin was detected in 4 (26.67%) S. aureus isolates. In total 40% of S. aureus produced more than one enterotoxin. Antimicrobial sensitivity tests revealed that all S. aureus strains were sensitive to amoxiciliin and ceftriaxone. In total 20% of S. aureus strains were resistant to tetracycline and ciprofloxacin and 16% of S. aureus strains were resistant to streptomycin.