Veikliųjų medžiagų kiekybinė analizė maisto papilduose: „Saldus miegas eliksyras“ skystis

Tyrimo tikslas: Ištirti maisto papildo „Saldus miegas eliksyras“ kiekybinę sudėtį ir parinkti analitinio tyrimo metodą. Tyrimo objektas: maisto papildas „Saldus miegas eliksyras“, skystis. Tyrimo metodai: efektyvioji skysčių chromatografija su tandeminiu masių spektrometru. Tyrimo rezultatai ir išvados: išnagrinėjus literatūrą apie naudojamus tirpiklius, ruošiant gama-amino sviesto rūgšties, 5-hidroksitriptofano bei melatonino mėginius ESC-MS/MS kiekybinei analizei atlikti, buvo pasirinktas išgryninto vandens/metanolio tirpiklių mišinys ir įvertintos 5 skirtingos tirpiklio koncentracijos. Išanalizavus gautus duomenis buvo pasirinktas tirpiklis, kurį sudarė lygiomis dalimis sumaišytas išgrynintas vanduo su metanoliu, kadangi naudojant šią koncentraciją buvo pasiektas didžiausias tiriamojo maisto papildo veikliųjų medžiagų išsiskyrimas lyginant su standartu. Analizės metodas buvo pasirinktas atsižvelgiant į išnagrinėtą literatūrą, tiriamųjų medžiagų poliškumą bei kitas fizikochemines savybes ir turimą įrangą laboratorijoje. Apibendrinus surinktą informaciją, pasirinktas efektyviosios skysčių chromatografijos metodas su tandeminiu masių spektrometru. Pritaikyta 0,1 % skruzdžių rūgšties tirpalo bei acetonitrilo eliuentų sistema bei parinkta Waters ACQUITY UPLC HSS C18 SB 1,8 μm, 2,1x150 mm atvirkštinių fazių kolonėlė, kuri dėl savo savybių pasižymi ilgesne analičių sulaikymo trukme. Atlikta efektyviosios skysčių chromatografijos su tandeminiu masių spektrometru metodikos validacija, siekiant įvertinti metodo tinkamumą atlikti maisto papildo „Saldus miegas eliksyras“ kiekybinės sudėties analizę. Įvertinti metodo validacijos parametrai atsižvelgiant į specifiškumą, tiesiškumą, glaudumą bei aptikimo ir kiekybinio nustatymo ribų atitikimo parametrus. Gauti rezultatai atitiko parametrų keliamus reikalavimus. Atlikus maisto papildo „Saldus miegas eliksyras“ trijų skirtingų gamybos serijų kiekybinę analizę ESC-MS/MS metodu, buvo vidutiniškai rasta 108-125 % gama-amino sviesto rūgšties, 82-115 % 5-hidroksitriptofano bei 85-117 % melatonino, lyginant su nurodytu kiekiu ant maisto papildo pakuotės. Šiame darbe parinktas analizės metodas yra tinkamas kitų farmacinių formų gama-amino sviesto rūgšties, 5-hidroksitriptofano bei melatonino kiekybinei analizei atlikti.

The aim of the study: To investigate the quantitative composition of the food supplement "Sweet Sleep Elixir" and to select the analyte test method. Object of research: food supplement "Sweet Sleep Elixir", liquid. Test methods: High performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry. Results and conclusions of the study: after examining the literature on the solvents used in the preparation of gamma-aminobutyric acid, 5-hydroxytryptophan and melatonin samples for HPLC-MS/MS quantitative analysis, a mixture of purified water/methanol solvents was selected and 5 different solvent concentrations were evaluated. After analysis of the data obtained, a solvent consisting of equal parts of purified water mixed with methanol was chosen, as this concentration achieved the highest release of the active substances of the test samples of food supplement compared to the standard. The method of analysis was chosen considering the literature reviewed, the polarity of the test substances and other physicochemical properties and available equipment in the laboratory. After summarizing the collected information, the method of high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry was chosen. An eluent system of 0.1% formic acid solution and acetonitrile was applied, and a Waters ACQUITY UPLC HSS C18 SB 1.8 μm, 2.1x150 mm reversed-phase column was selected due to its longer analyte retention time. The validation of the method of high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry was performed in order to evaluate the suitability of the method for the analysis of the quantitative composition of the food supplement “Sweet Sleep Elixir”. The validation parameters of the method were evaluated taking into account the specificity, linearity, precision and the compliance parameters of the limits of detection and quantification. The obtained results met the requirements of the parameters. Quantitative analysis results of three different batches of the food supplement "Sweet Sleep Elixir" by HPLC-MS/MS revealed an average of 108-125% gamma-aminobutyric acid, 82-115% 5-hydroxytryptophan and 85-117% melatonin compared to the amount indicated on the food supplement packaging. The method of analysis chosen in this work is suitable for the quantitative analysis of gamma-aminobutyric acid, 5-hydroxytryptophan and melatonin in other pharmaceutical forms.