Virusą imituojančia Poli I:C seka pažeistų kvėpavimo takų regeneracijos galimybių bioaktyviais augaliniais ekstraktais tyrimas

Dubininkaitė, Ieva

Use this url to cite ETD: https://hdl.handle.net/20.500.12512/111140

Virusą imituojančia Poli I:C seka pažeistų kvėpavimo takų regeneracijos galimybių bioaktyviais augaliniais ekstraktais tyrimas

Type of publication

type::text::thesis::master thesis

Title

Virusą imituojančia Poli I:C seka pažeistų kvėpavimo takų regeneracijos galimybių bioaktyviais augaliniais ekstraktais tyrimas

Other Title

Possibilities of Poly I:C Damaged Airway Cells Regeneration with Bioactive Plant Extracts

Author

Dubininkaitė, Ieva

Farmacinių technologijų institutas (U512100)

Advisor

Jekabsone, Aistė

Other(s)

Lukošius, Audronis	Recenzentas / Reviewer
Ivanauskas, Liudas	Komisijos pirmininkas / Committee Chairman
Ževžikovas, Andrejus	vicechairman
Ževžikovienė, Augusta	Komisijos sekretorius / Committee Secretary
Gudienė, Vilma	Komisijos narys / Committee Member
Savickas, Arūnas	Komisijos narys / Committee Member
Kasparavičienė, Giedrė	Komisijos narys / Committee Member
Daukšienė, Jurgita	Komisijos narys / Committee Member
Drakšienė, Gailutė	Komisijos narys / Committee Member
Kalvėnienė, Zenona	Komisijos narys / Committee Member
Majienė, Daiva	Komisijos narys / Committee Member
Radžiūnas, Raimondas	Komisijos narys / Committee Member
Stankūnienė, Aurima	Komisijos narys / Committee Member
Velžienė, Saulė	Komisijos narys / Committee Member
Skyrius, Vaidas	Komisijos narys / Committee Member
Gerbutavičienė, Rima Jūratė	Komisijos narys / Committee Member
Dagilytė, Audronė	Komisijos narys / Committee Member
Rodovičius, Hiliaras	Komisijos narys / Committee Member
Tatarūnas, Vacis	Komisijos narys / Committee Member
Lukošius, Audronis	Komisijos narys / Committee Member
Barsteigienė, Zita	Komisijos narys / Committee Member
Savickienė, Nijolė	Komisijos narys / Committee Member
Trumbeckaitė, Sonata	Komisijos narys / Committee Member
Burdulis, Deividas	Komisijos narys / Committee Member
Raudonė, Lina	Komisijos narys / Committee Member
Žilius, Modestas	Komisijos narys / Committee Member
Briedis, Vitalis	Komisijos narys / Committee Member
Kurapkienė, Vaida	Komisijos narys / Committee Member
Ramanauskienė, Kristina	Komisijos narys / Committee Member
Inkėnienė, Asta Marija	Komisijos narys / Committee Member
Minkutė, Rima	Komisijos narys / Committee Member
Vitkevičius, Konradas	Komisijos narys / Committee Member
Marksienė, Rūta	Komisijos narys / Committee Member
Kazlauskienė, Daiva	Komisijos narys / Committee Member
Kubilienė, Asta	Komisijos narys / Committee Member
Jekabsone, Aistė	Komisijos narys / Committee Member
Žvikas, Vaidotas	Komisijos narys / Committee Member
Kopustinskienė, Dalia Marija	Komisijos narys / Committee Member
Balčiūnaitė - Murzienė, Gabrielė	Komisijos narys / Committee Member
Liaudanskas, Mindaugas	Komisijos narys / Committee Member
Mazurkevičiūtė, Agnė	Komisijos narys / Committee Member
Sveikatienė, Renata	Komisijos narys / Committee Member
Šipailienė, Aušra	Komisijos narys / Committee Member
Degutytė, Rimgailė	Komisijos narys / Committee Member
Ragažinskienė, Ona	Komisijos narys / Committee Member
Akramas, Laimis	Komisijos narys / Committee Member

Extent

55 p.

Thesis Defence Date

2021-06-10

Keywords (lt)

Abstract (lt)

Tyrimo tikslas: Ištirti Poli I:C poveikį žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelėms, nustatyti šių ląstelių produkuojamų egzosomų gebėjimą perduoti Poli I:C į kitas ląsteles bei įvertinti galimybes sumažinti/pašalinti Poli I:C sukeltas pažaidas bioaktyviais augaliniais ekstraktais ir jų komponentais. Tyrimo uždaviniai: įvertinti viruso mimetiko Poli I:C poveikį žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelių metaboliniam aktyvumui; nustatyti, ar Poli I:C veikiamų žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelių egzosomos gali perduoti Poli I:C molekules mikroglijos ląstelėms; nustatyti sėjamųjų kanapių (lot. Cannabis sativa L.) komponentų įtaką Poli I:C sukeliamoms pažaidoms. Tyrimo objektas: kultivuojamos žmogaus kvėpavimo takų ląstelių linijos HBEC-3 ląstelės, veikiamos virusą imituojančia Poli I:C seka, kultivuojamos žmogaus mikroglijos linijos HMC-3 ląstelės, sėjamųjų kanapių preparatai. Tyrimo metodai: buvo kultivuojamos imortalizuotos žmogaus kvėpavimo takų ląstelės bei mikroglijos ląstelės; Poli I:C su prijungta fluorescuojančia žyme patekimas į egzosomas ir egzosomų patekimas į ląsteles buvo vertinamas fluorescenciniu mikroskopu; tiriamų mėginių poveikis kvėpavimo takų ląstelių metaboliniam aktyvumui vertinamas pagal PrestoBlue fluorescencijos intensyvumą matuojant plokštelių skaitytuvu. Rezultatai ir išvados: Nustatyta, jog Poli I:C veikiamų kvėpavimo takų epitelio ląstelių išskirtos egzosomos gali pernešti Poli I:C molekules į mikroglijos ląsteles. Poli I:C dvigubai sumažina kvėpavimo takų ląstelių bendrą metabolinį aktyvumą galimai sukeliant šių ląstelių žūtį. Iš tirtų sėjamųjų kanapių mėginių, didžiausiu nuo Poli I:C sukeliamo metabolinio aktyvumo slopinimo apsaugančiu poveikiu pasižymėjo preparatai su CBD. Tuo tarpu, gryno CBG preparatai ir mišiniai su CBG statistiškai reikšmingo apsauginio poveikio neturėjo. Tyrimo rekomendacijos: Rekomenduotina ištirti Poli I:C stimuliuotų kvėpavimo takų epitelio egzosomų poveikį smegenims in vivo. Taip pat, patartina įvertinti apsauginiu poveikiu pasižyminčių sėjamųjų kanapių preparatų įtaką kvėpavimo takų egzosomų turiniui ir gebėjimui sukelti uždegimą. Rekomenduotina sėjamųjų kanapių preparatų su CBD priešuždegiminį aktyvumą įvertinti COVID-19 in vitro modelyje.

Abstract (en)

Aim: To investigate the effect of Poly I:C on human airway epithelial cells, to determine the ability of exosomes produced by these cells to transfer Poly I:C to other cells and to evaluate the possibilities to reduce/eliminate Poly I:C-induced damage by bioactive plant extracts and their components. Objectives: to evaluate the effect of virus mimetic Poly I:C on the metabolic activity of human airway epithelial cells; to determine whether exosomes of human airway epithelial cells exposed to Poly I:C can transfer Poly I:C molecules to microglial cells; to determine the influence of industrial hemp components on Poly I:C-induced damage. Object: cultivated human respiratory epithelial line HBEC-3 cells exposed to the virus-mimetic Poly I:C sequence, cultured human microglial line HMC-3 cells, industrial hemp preparations. Methods: immortalized human airway cells and microglial cells were cultured; the entry of Poly I:C with attached fluorescent label into the exosomes and the entry of the exosomes into the cells was evaluated by fluorescent microscope; the effect of the industrial hemp samples on the metabolic activity of airway cells was evaluated by PrestoBlue assay measuring fluorescence intensity in a plate reader. Results and conclusions: It was shown that exosomes secreted by airway epithelial cells exposed to Poly I:C can transfer Poly I:C molecules to microglial cells. Poly I:C significantly affected the metabolic activity of human airway cells by decreasing it twice, most likely causing death of these cells. Of all tested hemp samples, CBD preparations had the greatest protective effect against Poly I:C induced inhibition of metabolic activity. Meanwhile, pure CBG preparations and mixtures with CBG had no statistically significant protective effect. Recommendations: It is recommended to investigate the effects of Poly I:C-stimulated airway epithelial exosomes for in vivo brain. It is also advisable to evaluate the influence of protective hemp preparations on the content of airway exosomes and their ability to cause inflammation. It is suggested that the anti-inflammatory activity of cannabis preparations with CBD would be evaluated in an in vitro COVID-19 model.