Chelidonium majus L. žolės fenolinių junginių kokybinės ir kiekybinės sudėties tyrimas
Naseckaitė, Elona |
Recenzentas / Reviewer |
E. Naseckaitės magistro baigiamasis darbas / mokslinis vadovas dr. Mindaugas Liaudanskas; Lietuvos sveikatos mokslų universiteto Farmacijos fakulteto Farmakognozijos katedra. – Kaunas. Pavadinimas: Chelidonium majus L. žolės fenolinių junginių kokybinės ir kiekybinės sudėties tyrimas. Tyrimo tikslas: Ištirti didžiųjų ugniažolių (Chelidonium majus L.) žolės ėminių fenolinių junginių kokybinę ir kiekybinę sudėtį ir įvertinti jų ištraukų antioksidacinį aktyvumą in vitro. Uždaviniai: 1. Nustatyti didžiųjų ugniažolių žolės ėminių fenolinių junginių ekstrakcijos sąlygas. 2. Įvertinti vegetacijos laikotarpiu surinktų didžiųjų ugniažolių žolės ėminių fenolinių junginių kiekybinės sudėties varijavimą. 3. Ištirti skirtingose augavietėse surinktų didžiųjų ugniažolių žolės ėminių fenolinių junginių kokybinę ir kiekybinę sudėtį. 4. Nustatyti didžiųjų ugniažolių žolės ištraukų antioksidacinį aktyvumą in vitro. 5. Įvertinti koreliaciją tarp didžiųjų ugniažolių žolės ėminių fenolinių junginių kiekio ir jų ištraukų antioksidacinio aktyvumo in vitro. Tyrimo objektas ir metodai: C. majus žolės ėminiai surinkti Drąseikių kaime, Kauno rajone vegetacijos periodo metu ir iš 6 skirtingų augaviečių: Jurbarko, Lazdijų, Skuodo, Telšių, Valkininkų ir Zarasų. Bendras fenolinių junginių kiekis C. majus žolės ėminiuose nustatytas spektrofotometrine Folin–Ciocâlteu metodika. C. majus žolės ėminių ištraukų antioksidacinis aktyvumas nustatytas ABTS, CUPRAC ir FRAP metodikomis. Pritaikius UESC metodą, nustatyta kokybinė ir kiekybinė individualių fenolinių junginių sudėtis. Tyrimo rezultatai ir išvados: Didžiausia fenolinių junginių išeiga nustatyta ekstrahavus C. majus žolės ėminius 38 proc. (v/v) etanoliu, 20 min., naudojant 791 W ultragarso galią. Didžiausias bendras fenolinių junginių kiekis (27,25±3,13 mg GRE/g) nustatytas birželio mėnesį surinktų C. majus žolės ėminiuose. Ištyrus skirtingose augavietėse surinktus C. majus žolės ėminius, didžiausias bendras fenolinių junginių kiekis (38,70±1,12 mg GRE/g) nustatytas Lazdijuose surinktuose C. majus žolės ėminiuose. Stipriausias antiradikalinis aktyvumas (302,53±11,54 µmol TE/g, p<0,05) nustatytas ištyrus Lazdijuose surinktų C. majus žolės ėminių ištraukas. Pritaikius CUPRAC metodiką stipriausiu redukciniu aktyvumu (660,42±4,38 µmol TE/g, p<0,05) pasižymėjo Lazdijuose surinktų ėminių ištraukos, FRAP metodiką – Telšiuose rinktų ėminių ištraukos (112,25±8,59 µmol TE/g). Vegetacijos metu stipriausias antiradikalinis aktyvumas (177,53±22,28 µmol TE/g) nustatytas ištyrus liepos mėnesį surinktų C. majus žolės ištraukas. Naudojant CUPRAC metodiką, stipriausias redukcinis aktyvumas nustatytas ištyrus liepos mėnesį (188,88±7,49 µmol TE/g, p<0,05), FRAP metodiką – rugpjūčio mėnesį (58,63±4,68 µmol TE/g) rinktų C. majus žolės ėminių ištraukas. Atlikus C. majus žolės ėminių analizę UESC metodu, identifikuoti 9 junginiai, tarp kurių vyravo rutinas. Nustatyta stipri koreliacija tarp bendro fenolinių junginių kiekio ir redukcinio aktyvumo, įvertinto CUPRAC bei FRAP metodikomis.
Final Master‘s thesis by E. Naseckaitė/ supervisor Dr. M. Liaudanskas; Department of Pharmacognosy at the Faculty of Pharmacy, Lithuanian University of Health Sciences. – Kaunas. The title of the master thesis. Qualitative and quantitative study of the composition of phenolic compounds in Chelidonium majus L. herb. The aim of the research. To determine the qualitative and quantitative composition of phenolic compounds in herb samples of the greater celandine (Chelidonium majus L.) and evaluate the antioxidant activity of their ethanolic extracts. The objectives of the research. 1. To determine the conditions for extraction of phenolic compounds from herb samples of greater celandine. 2. To assess the variation in the quantitative composition of phenolic compounds in herb samples of greater celandine collected during the growing season. 3. To investigate the qualitative and quantitative composition of phenolic compounds in phenolics of greater celandine herb samples collected from different growing sites 4. Determine the antioxidant activity of greater celandine herb extracts. 5. To assess the correlations between the phenolic content of the phenolic compounds of the greater celandine herb samples and the antioxidant activity of their extracts. The object and methods of the research. The herb samples of C. majus were collected in Drąseikiai village, Kaunas district, in the same place, during the vegetation period, and from 6 different sites in Lithuania: Jurbarkas, Lazdijai, Skuodas, Telšiai, Valkininkai and Zarasai. Total phenolic compounds in C. majus herb samples were determined by spectrophotometric Folin-Ciocâlteu method. The antioxidant activity of the extracts of C. majus herb samples was determined by ABTS, CUPRAC and FRAP assays. The qualitative and quantitative composition of individual phenolic compounds was determined by UHPLC method. The results and conclusions of the research. The highest yield of phenolic compounds was obtained after extraction of C. majus herb samples with 38% (v/v) ethanol for 20 min using ultrasonic power of 791 W. The highest total phenolic compounds (27.25±3.13 mg GAE/g) were found in C. majus herb samples collected in June. The highest total phenolic content (38,70±1,12 mg GAE/g) was found in the C. majus herb samples collected in Lazdijai. The strongest antiradical activity (302,53±11,54 µmol TE/g, p<0,05) was found in extracts of C. majus herb samples collected in Lazdijai. The strongest reducing activity (660.42±4.38 µmol TE/g, p<0.05) was observed in the extracts of samples collected in Lazdijai using the CUPRAC assay, while the strongest reducing activity (112.25±8.59 µmol TE/g) was observed in the extracts of samples collected in Telšiai using the FRAP assay. During the growing season, the strongest antiradical activity (177.53±22.28 µmol TE/g) was found in the herb extracts of C. majus collected in July. Using the CUPRAC assay, the strongest reducing activity was obtained in July (188.88±7.49 µmol TE/g, p<0.05) and the strongest reducing activity was obtained using the FRAP method in August (58.63±4.68 µmol TE/g). Analysis of herb samples by HPLC identified 9 compounds, among which rutin was the most predominant. A very strong correlation was found between the total amount of phenolic derivatives and the reducing activity as assessed by CUPRAC and FRAP assays.