Remielinizacijos procese dalyvaujančių miRNR tyrimas išsėtine skleroze sergančių pacientų kraujo mėginiuose
Vaineikytė, Ieva |
Recenzentas / Reviewer |
Tyrimo tikslas: įvertinti remielinizacijos procese dalyvaujančių miRNR molekulių raišką pacientams su išsėtine skleroze. Uždaviniai: 1. Palyginti miR-219a-5p ir miR-338-5p molekulių raišką tarp pacientų, sergančių išsėtine skleroze, ir sveikų tiriamųjų. 2. Palyginti tiriamų miRNR molekulių raišką, atsižvelgiant į sergančiųjų išsėtine skleroze ligos eigą modifikuojantį gydymą. 3. Įvertinti miR-219a-5p ir miR-338-5p molekulių raiškos skirtumus tarp išsėtinės sklerozės pacientų ir kontrolinės grupės asmenų, atsižvelgiant į lytį. Tyrimo metodai: Kraujo mėginiai miRNR raiškos tyrimams buvo surinkti į specialius „Tempus™ Blood RNA Tubes“ mėgintuvėlius. RNR buvo gryninama iš 58 išsėtinės sklerozės pacientų ir 58 kontrolinės grupės asmenų bendro kraujo naudojant „mirVana™ miRNA Isolation Kit“ rinkinį. Kopijinės DNR sintezė buvo atlikta naudojant „TaqMan® Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit“ rinkinį. MikroRNR molekulių raiškos buvo nustatomos tikro laiko PGR (TL-PGR) metodu, o gauti duomenys buvo analizuojami „ThermoFisher Cloud“ platformoje. Rezultatų statistinis reikšmingumas buvo apskaičiuotas su „IBM SPSS Statistics 29.0.2.0” programa. Rezultatai ir išvados: Tyrimo metu nebuvo nustatyti reikšmingi miR-219a-5p ir miR-338-5p raiškos skirtumai tarp pacientų su išsėtine skleroze ir kontrolinės grupės, kurią sudarė neurologiškai sveiki asmenys, neturintys autoimuninių ligų (p>0,05). Vertinant, ar yra reikšmingų miR-219a-5p raiškos skirtumų tarp medikamentus vartojančių ir nevartojančių pacientų, reikšmingų skirtumų nebuvo nustatyta (p>0,05). Tuo tarpu miR-338-5p raiškos skirtumų analizė parodė, kad tarp 2 eilės vaistus vartojančių pacientų miR-338-5p raiška buvo reikšmingai didesnė lyginant su nuo 1 eilės vaistų prie 2 eilės vaistų perėjusių pacientų raiška (p<0,05). Atlikus miR-219a-5p ir miR-338-5p raiškų skirtumų vertinimą tarp lyčių nebuvo aptikta reikšmingų skirtumų (p>0,05).
Aim of the study: To assess the expression of miRNAs involved in the remyelination process in patients with multiple sclerosis. Objectives of the study: 1. To compare the expression of miR-219a-5p and miR-338-5p molecules between multiple sclerosis patients and healthy subjects. 2. To compare the expression of miRNA molecules in multiple sclerosis patients in relation to disease-modifying therapy. 3. To assess the differences in the expression of miR-219a-5p and miR-338-5p molecules between multiple sclerosis patients and controls, according to gender. Methods: Blood samples for miRNA expression studies were collected into special Tempus™ blood RNA tubes. RNA was isolated from blood of 58 multiple sclerosis patients and 58 controls by using mirVana™ miRNA Isolation Kit and the cDNR synthesis was performed using the TaqMan® Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit. MiRNA expression was detected by using qRT-PCR method and the results were analyzed with ThermoFisher Cloud platform. The statistical significance of the results was assessed using IBM SPSS Statistics 29.0.2.0. Results and conclusions: The study found no significant differences in the expression of miR-219a-5p and miR-338-5p between multiple sclerosis patients and a control group of neurologically healthy individuals without autoimmune diseases (p>0.05). No significant differences in miR-219a-5p expression were found between medically treated and untreated patients (p>0.05). In contrast, the analysis of differences in miR-338-5p expression showed that miR-338-5p expression was significantly higher in patients that taking 2nd-line drugs compared to those switched from 1st-line to 2nd-line drugs (p<0.05). Assessment of differences in miR-219a-5p and miR-338-5p expression between genders revealed no significant differences (p>0.05).