Žmogaus karboanhidrazės IX slopiklių pritaikymas padidinti vaistų transportą vėžio ląstelių kultūrose

Staniulytė, Monika

Use this url to cite ETD: https://hdl.handle.net/20.500.12512/100683

Žmogaus karboanhidrazės IX slopiklių pritaikymas padidinti vaistų transportą vėžio ląstelių kultūrose

Type of publication

type::text::thesis::master thesis

Title

Žmogaus karboanhidrazės IX slopiklių pritaikymas padidinti vaistų transportą vėžio ląstelių kultūrose

Other Title

Application of human carbonic anhydrase IX inhibitors to enhance drug transport into cancer cell culture models

Author

Staniulytė, Monika

MA Farmacijos fakultetas (U510000)

Advisor

Petrikaitė, Vilma

Other(s)

Nenortienė, Palma	Recenzentas / Reviewer
Kalvėnienė, Zenona	Komisijos sekretorius / Committee Secretary
Bernatonienė, Jurga	Komisijos pirmininkas / Committee Chairman
Kasparavičienė, Giedrė	Komisijos narys / Committee Member
Drakšienė, Gailutė	Komisijos narys / Committee Member
Mekas, Tauras Antanas	Komisijos narys / Committee Member
Gerbutavičienė, Rima Jūratė	Komisijos narys / Committee Member
Brusokas, Valdemaras	Komisijos narys / Committee Member
Rodovičius, Hiliaras	Komisijos narys / Committee Member
Ivanauskas, Liudas	Komisijos narys / Committee Member
Vitkevičius, Konradas	Komisijos narys / Committee Member
Savickienė, Nijolė	Komisijos narys / Committee Member
Jakštas, Valdas	Komisijos narys / Committee Member
Maruška, Audrius Sigitas	Komisijos narys / Committee Member
Benetis, Raimondas	Komisijos narys / Committee Member

Extent

46 p.

Thesis Defence Date

2017

Keywords (lt)

Abstract (lt)

M.Staniulytės magistro baigiamasis darbas „Žmogaus karboanhidrazės IX slopiklių pritaikymas padidinti vaistų transportą vėžio ląstelių kultūrose“. Mokslinė vadovė doc. dr. V.Petrikaitė; Lietuvos sveikatos mokslų universiteto Farmacijos fakulteto Vaistų chemijos katedra. Kaunas, 2017. Darbo tikslas – įvertinti žmogaus karboanhidrazės (CA) slopiklių poveikį doksorubicino ir jo pegiliuotos liposominės formos (PLD) transportui vėžio ląstelių kultūrose. Darbo uždaviniai:

Ištirti doksorubicino ir PLD patekimą į vėžio ląsteles.
Įvertinti CA IX slopiklių įtaką doksorubicino ir PLD patekimui į ląsteles.
Ištirti doksorubicino ir PLD transportą į vėžio ląstelių sferoidus.
Ištirti doksorubicino ir PLD transportą į vėžio ląstelių sferoidus po inkubacijos su žmogaus CA IX slopikliais skirtingo pH terpėse. Tyrimo metodai. Doksorubicino ir PLD patekimas į ląsteles ir selektyvaus CA IX slopiklio įtaka šiam procesui įvertinti silpnai bazinėje (pH 7,2) ir rūgštinėje (pH 6,0) terpėse skirtingais inkubacijos laikotarpiais (nuo 1 iki 4 val.), įvertinus ląstelių fluorescencijos intesyvumą Image J programa. Vėžio sferoidai suformuoti taikant 3D Bioprinting metodą. Doksorubicino ir PLD patekimas į sferoidus 1 8 val. laikotarpyje nustatytas vertinant fluorescencijos intensyvumą sferoiduose silpnai bazinėje ir rūgštinėje terpėse. Junginių toksiškumas ląstelėms nustatytas MTT metodu. Rezultatai. Doksorubicinas ir PLD į ląsteles patenka geriau silpnai bazinėje (pH 7,2), nei rūgštinėje (pH 6,0) terpėje (p < 0,05). CA IX slopiklis VD11 4 2 padidina doksorubicino ir PLD patekimą į ląsteles rūgštinėje terpėje (p < 0,05), o silpnai bazinėje terpėje įtakos skvarbai į ląsteles neturi (p > 0,05). Vėžio ląstelių sferoiduose doksorubicino koncentracija centrinėje zonoje didėja ilgėjant inkubacijos laikui silpnai bazinėje terpėje. Tuo tarpu PLD skvarba ir pasiskirstymas sferoiduose nepriklauso nuo inkubacijos laiko ir terpės pH. Junginys VD11 4 2 pagerina doksorubicino skvarbą į vėžio ląstelių sferoidus rūgštinėje terpėje, tačiau neturi įtakos PLD skvarbai rūgštinėje ir silpnai bazinėje terpėje. Išvados. Selektyvus CA IX slopiklis VD11 4 2 padidina doksorubicino pateikimą rūgštinėje terpėje į vėžio ląstelių sferoidus, ir yra perspektyvus junginys tolimesniems tyrimams, siekiant pagerinti silpnai bazinių vaistų skvarbą į navikus.

Abstract (en)

M.Staniulytė Master Thesis “Application of human carbonic anhydrase IX inhibitors to enhance drug transport into cancer cell culture models”. Scientific supervisor – Assoc. Prof. V.Petrikaitė. Department of Drug Chemistry, Faculty of Pharmacy, Lithuanian University of Health Sciences. Kaunas, 2017. The aim of the research was to evaluate the effect of human carbonic anhydrase (CA) inhibitors on doxorubicin and its pegylated liposomal form’s (PLD) penetration in cancer cell cultures. Objectives:

To investigate the intracellular uptake of doxorubicin and PLD into cancer cells.
To evaluate the influence of CA inhibitors upon intracellular uptake of doxorubicin and PLD.
To investigate the penetration of doxorubicin and PLD into tumour spheroids.
To investigate the effect of CA inhibitors on penetration of doxorubicin and PLD in tumour spheroids. Methods. Intracellular uptake of doxorubicin and PLD as well as the effect of CA inhibitors at different pHs (slightly basic 7.2 and acidic 6.0) were evaluated after the incubation of 1 to 4 hours by measuring the average fluorescence intensity in cells using ImageJ program. Tumour spheroids were formed using 3D Bioprinting method. The penetration of doxorubicin and PLD into spheroids was evaluated by measuring the fluorescence intensity after incubation of 1 to 8 hours at different pH media. The cytotoxicity of the compounds was measured by MTT assay. Results. Cellular uptake of doxorubicin and PLD is better in slightly basic media (pH 7.2) than in acidic one (pH 6.0, p < 0.05). CA IX selective inhibitor VD11 4 2 enhances the cellular uptake of both doxorubicin and PLD at acidic pH, but has no effect at slightly basic pH (p > 0.05). The concentration of doxorubicin in tumour spheroids is favourably dependent on the time of incubation in slightly basic media. However, the penetration and distribution of PLD in tumour spheroids shows no dependence upon the time of incubation or the pH of the media. VD11 4 2 enhances the penetration of doxorubicin into the spheroids at acidic pH yet has no effect on penetration of PLD at either slightly basic or acidic pH. Conclusions. Selective CA IX inhibitor VD11 4 2 improves the cellular uptake of doxorubicin into tumour spheroids in acidic media. Therefore, it is a perspective compound for future studies in order to enhance the penetration of weakly basic drugs into tumours.