Žmogaus kasos vėžio trimačių kultūrų in vitro modeliavimo įtaka doksorubicino aktyvumui
Juodžbalys, Nidas |
Recenzentas / Reviewer |
Tyrimo metodai. Šiame darbe įvertinta žmogaus kasos vėžio sferoidų, suformuotų ant agarozės ir kabančio lašo metodais, augimo dinamikos ir jų formavimo metodo įtaka doksorubicino (DOX) poveikiui. Sferoidų augimo dinamika ir jų savybės įvertintos fazinio kontrasto mikroskopu pagal skersmens pokytį. Doksorubicino (DOX) poveikis sferoidams įvertintas pagal sferoidų skersmens pokytį ir ląstelių gyvybingumą, taikant MTT redukcijos metodą. DOX transportas į sferoidus įvertintas naudojant fluorescencinę mikroskopiją. Rezultatai. Žmogaus kasos vėžio sferoidai, suformuoti kabančio lašo metodu, buvo apie 1,1 karto didesni, nei sferoidai, suformuoti ant agarozės. DOX panašiai slopino abiem būdais suformuotų sferoidų augimą ir mažino jų ląstelių gyvybingumą, nepriklausomai nuo sferoidų dydžio. DOX fluorescencijos intensyvumas buvo apie 1,1 kartus didesnis ant agarozės metodu suformuotose sferoiduose nei sferoiduose, suformuotose kabančio lašo metodu, tačiau šis skirtumas nebuvo statistiškai reikšmingas. Išvados. Žmogaus kasos vėžio PANC-1 ir MIA PaCa-2 sferoidų augimo dinamika ir jų savybės nepriklauso nuo sferoidų modeliavimo būdo. Priešvėžinis vaistas DOX statistiškai nereikšmingai sumažino PANC-1 ir MIA PaCa-2 sferoidų augimą, lyginant kabančio lašo ir ant agarozės metodus. Doksorubicino transportas į PANC-1 ir MIA PaCa-2 ląstelių sferoidus nepriklauso nuo jų formavimo metodo, bet priklauso nuo naudoto doksorubicino koncentracijos.
Research methods. This paper presents the growth dynamics of human pancreatic cancer spheroids formed on agarose and hanging drop methods and the influence of their formation method on the effect of the compound. The growth dynamics of spheroids and their properties were evaluated by phase contrast microscopy according to the change in diameter. The effect of doxorubicin (DOX) on spheroids was assessed by the change in spheroid diameter and cell viability using the MTT reduction method. Transport of DOX into spheroids was assessed using fluorescence microscopy. Results. Human pancreatic cancer spheroids, formed using the hanging drop method, were approximately 1.1 times larger than those formed on agarose. DOX similarly inhibited the growth of spheroids formed by both methods and reduced their cell viability, regardless of spheroid size. The fluorescence intensity of DOX was approximately 1.1 times higher in spheroids formed using the agarose method compared to those formed using the hanging drop method; however, this difference was not statistically significant. Conclusions. The growth dynamics and properties of human pancreatic cancer PANC-1 and MIA PaCa-2 spheroids are not dependent on the spheroid formation method. The anticancer drug DOX did not significantly reduce the growth of PANC-1 and MIA PaCa-2 spheroids when comparing the hanging drop and agarose methods. The transport of doxorubicin into PANC-1 and MIA PaCa-2 cell spheroids does not depend on the method of their formation but is influenced by the used concentration of doxorubicin.