Naujas gliukozės koncentracijos pokyčių valdomas gelio adjuvantas imunizacijoms žmogaus augimo hormonu

Abstract

Nauja gliukozei jautraus poli(N-vinil-2-pirolidono) ir fenilboro rūgšties kopolimero bei dekstrano Sephadex G-100 gelio kompozicija buvo naudota kaip pagalbinė medžiaga (adjuvantas) jūros kiaulyčių imunizavimui žmogaus augimo hormonu. Fluorescenciniu žymekliu Alexa Fluor 660 pažymėtas žmogaus augimo hormonas buvo naudotas hormono išsiskyrimui iš adjuvanto in vivo tyrinėti. Kopolimero kompleksas su sefadekso geliu terpėje esant gliukozei yra grįžtamai disocijuojamas, kas padidina granulių paviršiaus porėtumą. Panaudojant šią kompozicijos savybę buvo pasiūlytas naujas žmogaus augimo hormono valdomo in vivo išsiskyrimo metodas. Įrodyta, kad poodinių kompozicijos granulėse imobilizuoto žymėto hormono injekcijų atveju hormono išsiskyrimo iš adjuvanto greitis didėja didėjant gliukozės koncentracijai aplinkoje. Tomis pačiomis sąlygomis antigenu imunizacijai panaudojus nežymėtą hormoną buvo gautas pakankamai geras antiserumas prieš žmogaus augimo hormoną, kas rodo, jog iš kompozicijos granulių išsiskyręs hormonas nepraranda savo antigeninio specifiškumo ir pasiūlyta kompozicija yra tinkama naudoti kaip adjuvantas imunizavimui žmogaus augimo hormonu. New composite- glucose-sensitive copolymer - poly(N-vinyl-2-pyrolidone) with a phenylboronic acid moiety in complex with dextran hydrogel Sephadex G-100 - was used as adjuvant for guinea-pig immunization with human growth hormone. Fluorescent labeled with Alexa Fluor 660 hormone was used for the study of the release of the hormone from the adjuvant in vivo. Complex of copolymer with Sephadex can be reversible dissociated in the presence of glucose, that gives higher porosity of the bead surface. Based on this characteristic of the composite a new method of the controlled release of hormone in vivo was proposed. It was proved that in case of subcutaneous injection of immobilized in the composite beads labeled hormone gives higher rates of hormone release from adjuvant in the present of higher concentration of glucose. Unlabeled hormone was used as antigen for immunization by the same conditions and enough good and specific antiserum against human growth hormone was got, that reveals that from composite beads released hormone does not loose its antigenic specificity and proposed composite is usable as adjuvant for immunization with human growth hormone.