Kamieninių ląstelių iš žandikaulio antkaulio ir dantų pulpos palyginamoji analizė

Abstract

Įžanga Pastaruoju metu sparčiai populiarėja kamieninių ląstelių tyrimai ir bandymai jas panaudoti atkuriamojoje medicinoje. Veido ir žandikaulių sritis nenusileidžia poreikiu tobulinti atkuriamąją ir regeneracinę medicinos sritį. Pavykus išskirti kamienines ląsteles iš žandikaulio antkaulio ir danties pulpos, kilo mintis palyginti jų kamieniškumą, osteogeniškumą. Tikslas Išskirti mezenchimines kamienines ląsteles iš žandikaulio antkaulio ir danties pulpos ir ištirti bei palyginti jų kamieniškumą ir osteogeniniškumą. Uždaviniai 1. Išskirti ir kultivuoti mezenchimines kamienines ląsteles iš žandikaulio antkaulio ir danties pulpos. 2. Atlikti išskirtų kamieninių ląstelių imunohistocheminį identifikavimą. 3. Naudojant osteogeninę diferenciacijos terpę įvertinti išskirtų kamieninių ląstelių osteogenines savybes. 4. Palyginti išskirtų kamieninių ląstelių kamieniškumą, osteogeniškumą bei proliferaciją. Metodika Pagal šiuolaikinių mokslininkų patirtį pasirinkti bei patobulinti mezenchiminių kamieninių ląstelių iš žandikaulio antkaulio išskyrimo ir kultivavimo protokolai. Gautas Lietuvos Sveikatos Mokslų Universiteto (LSMU) Bioetikos centro leidimas (Nr. BEC- OF- 01). Atliekant rutinines protinių dantų šalinimo operacijas LSMU Veido ir Žandikaulių chirurgijos skyriuje, paimama žandikaulio antkaulio mėginys ir protiniai dantys. Medžiaga pernešama į laboratoriją transportinėje terpėje. Ląstelės išskiriamos ir kultivuojamos pagal patobulintą protokolą vertinant ląstelių proliferaciją. Imunohistocheminiu metodu identifikuojamos išskirtų kamieninių ląstelių kultūros, naudojant CD34, CD45, CD90 ir DAPI ląstelių biologinius markerius. Išskirtos kamieninės ląstelės perkeliamos į osteogeninės diferenciacijos terpę. Ląstelės iš diferenciacijos terpės užšaldomos NEG50 šaldymo terpėje. Užšaldyti mėginiai pjaustomi kriotomu 8-μm storio pjūviais.[...].