Eozinofilai, aktyvindami WNT-5a signalinį kelią, skatina bronchų lygiųjų raumenų kontraktiliškumą sergant astma
Author | Affiliation | |
---|---|---|
Lietuvos sveikatos mokslų universitetas. Medicinos akademija |
Moksliniai darbai ir apžvalgos
Astma yra lėtinė uždegiminė plaučių liga, kuriai būdinga kvėpavimo takų eozinofilija. Uždegimas apima ir plaučių struktūrines ląsteles: bronchų lygiųjų raumenų ląsteles, fibroblastus, kurių aktyvumas valdomas per uždegiminių ląstelių išskiriamus mediatorius. Iki šiol neaišku, kaip eozinofilai veikia bronchų lygiųjų raumenų ląstelių kontraktiliškumą. Tyrimo tikslas. Įvertinti eozinofilų įtaką WNT-5a signalinio kelio aktyvumui ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelių kontraktiliškumui sergant astma. Metodai. Į tyrimą įtraukti penki sergantieji alergine astma ir penki sveiki asmenys. Kraujo eozinofilai išskirti naudojant aukšto tankio centrifugavimą ir magnetinę separaciją. Sudarytos kombinuotosios eozinofilų ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelių linijos kultūros. Kontraktiliškumas vertintas naudojant kolageno gelio metodą. Po 24 val. inkubacijos eozinofilai atskirti nuo bronchų lygiųjų raumenų ląstelių ir ląstelės lizuotos. Išskyrus suminę RNR, atlikta genų raiškos analizė taikant TL-PGR. Rezultatai. Bronchų lygiųjų raumenų ląstelių kontraktiliškumas po inkubacijos su alergine astma sergančiųjų eozinofilais buvo 5,7 proc. didesnis lyginant su sveikais asmenimis (p<0,05). α-aktino, WNT5a, TGF-β1, genų raiška bronchų lygiųjų raumenų ląstelėse po inkubacijos su astma sergančiųjų eozinofilais statistiškai reikšmingai padidėjo, lyginant su sveikų asmenų eozinofilų poveikiu (atitinkamai: α-aktino raiška padidėjo 1,6±0,1, lyginant su 1,0±0,2; WNT-5a – 1,8±0,5, lyginant su 1,0±0,2; TGF-β1 – 2,1±0,6, lyginant su 1,10±0,25 kartais nuo kontrolinių, eozinofilais neveiktų bronchų lygiųjų raumenų ląstelių, p<0,05). Išvados. Eozinofilai skatina bronchų lygiųjų raumenų kontraktiliškumą bei α-aktino geno raišką. Šie pokyčiai gali būti sukelti WNT-5a signalinio kelio aktyvumo.
Airway eosinophilia is a prominent feature of asthma. The level of airway smooth muscle (ASM) activation is putatively controlled by mediators released. There are studies on eosinophil-induced changes of ASM activity while the exact role of eosinophil in ASM contractility in asthma remains unclear. Aim. To evaluate the effect of eosinophils on WNT-5a signaling pathway activation and ASM contractility in asthma. Methods. 5 allergic asthma patients (AA) and 5 healthy subjects (HS) were examined. Blood eosinophils were isolated using high-density centrifugation and magnetic separation. Individual combined cultures of eosinophils and healthy immortalized ASM cells were prepared. Contractility was evaluated using collagen gel method. For gene expression analysis ASM cells were lysed and total RNA purified after 24 h of incubation with eosinophils. Gene expression was evaluated using RT-qPCR analysis. Results. ASM cells contractility increased 5.7% after incubation with AA eosinophils compared to HS eosinophils (p<0.05). Genes expression of α-actin, WNT-5a, TGF-β1 was higher in ASM cells after incubation with AA eosinophils compared to HS eosinophils (accordingly: 1.6±0.1 vs. 1.0±0.2; 1.8±0.5 vs. 1.0±0.2; 2.1±0.6 vs. 1.1±0.3 folds over control; p<0.05). Conclusions. Eosinophils promote ASM cells contractility as well as α-actin gene expression and these changes may be induced via WNT5a signaling pathway.