Eozinofilai slopina plaučių struktūrinių ląstelių apoptozę bei skatina jų proliferaciją sergant astma

Abstract

Įvadas. Plaučių fibroblastai ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelės yra pagrindinės ląstelės, dalyvaujančios kvėpavimo takų remodeliacijoje sergant astma. Fibroblastai gausiai išskiria bei valdo kiekybinius ir kokybinius jungiamojo audinio komponentų pokyčius, kai tuo tarpu bronchų lygiųjų raumenų ląstelės dalyvauja besivystant kvėpavimo takų obstrukcijai dėl kintančio jų kiekio bei dydžio. Mes manome, kad eozinofilai– pagrindinės uždegiminės ląstelės astmos metu – gali paveikti fibroblastų ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelių proliferaciją, slopindami jų apoptozę, ir taip prisideda prie kvėpavimo takų remodeliacijos vystymosi. Tyrimo tikslas. Ištirti eozinofilų įtaką plaučių fibroblastų ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelių apoptozei bei proliferacijai sergant astma. Metodai. Tyrime buvo sudaromos individualios kombinuotosios kultūros tarp žmogaus plaučių fibroblastų (MRC-5) ląstelių linijos arba bronchų lygiųjų raumenų ląstelių ir išskirtų eozinofilų iš 11 sergančių astma pacientų bei 7 kontrolinių asmenų kraujo. Eozinofilų adhezija buvo vertinama matuojant eozinofilų peroksidazės aktyvumą in vitro po 1 val. inkubacijos su struktūrinėmis ląstelėmis; apoptozė vertinta tėkmės citometru naudojant aneksino V FITC – propidžio jodido dažymą po 24 val. inkubacijos su eozinofilais; fibroblastų ir bronchų lygiųjų raumenų ląstelių proliferacija matuota naudojant Alamaro mėlio reagentą po 72 val. inkubacijos su eozinofilais. Rezultatai pateikiami vidurkiu ir standartine vidurkio įverčio paklaida. Rezultatai. Sergančiųjų astma eozinofilų adhezija prie fibroblastų buvo 150±25 proc., o prie bronchų lygiųjų raumenų ląstelių – 206±52 proc. didesnė, lyginant su sveikų asmenų eozinofilų adhezija (p<0,01). Be to, inkubacija su sergančiųjų astma eozinofilais patikimai sumažino apoptotinių fibroblastų skaičių kombinuotoje kultūroje 22±4 proc.,