Изучение влияния рибосом на термостабильность аминоацил-тРНК-синтетаз печени кроликов
Date |
---|
1988-12-23 |
Одной из отличительных особенностей эукариотических аминоацил-тРНК-синтетаз (АРСаз) является их способность образовывать ассоциаты с полириболомами. Вопрос о биологическом значении взаимодействии АРСаз с рибосомами все еще окончательно не решен. Высказано предположение, что эти взаимодействия существенны для поддержания активной конформации АРСаз. В данной работе изучено влияние рибосом на териостабильность АРСаз печени кроликов в норме и через 12 ч после воспроизведения экспериментального инфаркта миокарда (ЭИМ). Суммарные рибосомы выделяли из печени кроликов по методу Ветштайна с некоторыми модификациями. АРСазы отмывали от рибосом 0,05 М трис-НС1 буфером, рН 7,5, содержащим 0,5 М КС1 0,01 М МgCl2 и 0,25 М сахарозу. Реассоциацию АРСаз и рибосом проводили после предварительного диализа в 0,05 М трис- НС1 буфере, рН 7,5, содержащем 0,01 М МgCl2, 0,25 М сахарозу, 0,1 мМ дитиотреитол, 0,1 мМ фенилметилсульфонилфторид, в течение 1 ч при 4°С в соотношении по белку 1:6 соответственно. Термоинактивацию АРСаз изучали при 42 °С по методу, описанному в работе.