Rekombinantinių bakteriocinų naudojimas Klebsiella quasipneumoniae sukeltai žarnyno infekcijai gydyti

Abstract

Klebsiella quasipneumoniae – hospitalinių infekcijų (HI) sukėlėjas pasižymintis dauginiu atsparumu antimikrobiniams preparatams, kuris klinikinėje praktikoje dažnai klaidingai nustatomas kaip Klebsiella pneumoniae. Naujausi mokslininkų darbai parodė, kad enteraliniu būdų vartojami bakteriocinai, tokie kaip klebicinai, gali būti viena pažangiausių priemonių Klebsiella sukeltų HI gydymui. Tyrimo pagrindinis tikslas – panaudojus gyvūnų eksperimentinius modelius, įvertinti rekombinantinio bakteriocino (klebicino KvarIa) efektyvumą K. quasipneumoniae sukeltos virškinamojo trakto infekcijos gydymui. Visų pirma, buvo nustatytas K. quasipneumoniae gebėjimas kolonizuoti BALB/C pelių virškinamąjį traktą. Tyrimą sudarė keturios grupės (n = 12 (3 gyvūnai grupėje)). Kontrolinės grupės pelėms nebuvo skiriami antibiotikai ar bakterijos. Bakterijų kontrolinei grupei – atliktas tik K. quasipneumoniae įvedimas, likusioms dviem grupėms, prieš bakterijų kultūrų įvedimą į virškinamąjį traktą, buvo paskirti skirtingi antibiotikų deriniai: (I) penicilinas ir streptomicinas, bei (II) penicilinas, streptomicinias, metronidazolas. KvarIa antimikrobinio efektyvumo įvertinimui panaudotas panašus eksperimentinis modelis. Kontrolinės grupės pelėms buvo duotas fosfatinis buferinis druskos tirpalas (PBS), o kitoms grupėms – paskirtos skirtingos klebicino KvarIa koncentracijos (100 μg nepadengta-KvarIa, 100 μg Eudragit padengta-KvarIa, 1000 μg Eudragit padengta-KvarIa, n = 12 (3 gyvūnai grupėje)). Klebsiella hemolizino genas (khe) pasirinktas kaip molekulinis žymuo K. quasipneumoniae kolonizacijai ir antimikrobiniam KvarIa efektyvumui nustatyti. Atliktas khe tikro laiko PGR tyrimas DNR lygmenyje bei khe standartinių kreivių tyrimas panaudojant žinomas K. quasipneumoniae skirtingas koncentracijas. Virškinamojo trakto kolonizacija buvo stebima grupėse, kuriose prieš K. quasipneumoniae įvedima buvo sutrikdyta natūrali mikroflora panaudojant antibiotikų terapiją. Pirmojoje grupėje (penicilinas ir streptomicinas) bakterijų skaičius DNR mėginiuose buvo apie 8,57 × 109 cfu/70mg; antrojoje grupėje (penicilinas, streptomicinas, ir metronidazolas) – 8,65 × 109 cfu/70mg. Khe žymuo buvo nenustatytas kontrolinėse ar bakterijų kontrolinėse grupėse. KvarIa efektyvumo tyrimas parodė, kad Eudragit padengtas klebicinas statistiškai reikšmingai sumažina K. quasipneumoniae bakterijų kolonizaciją žarnyne (bakterijų skaičius kontrolinėje grupėje – 8,06 × 108 cfu/25mg; o pelių kurioms be bakterijų buvo skirta ir KvarIa terapija ~5,40 × 106 cfu/50mg). Apibendrinant, K. quasipneumoniae gali kolonizuoti pelių virškinamąjį traktą tik po antibiotikų terapijos, o klebicinas KvarIa žymiai sumažina šių bakterijų populiaciją žarnyne.