Protonų siurblio slopiklio lanzoprazolo įtaka doksorubicino ir jo pegiliuotos formos skvarbai į krūties vėžio ląsteles

Abstract

Įžanga Krūties vėžys yra labiausiai paplitęs navikinis susirgimas tarp moterų. Naviko mikroaplinkai būdinga hipoksija ir acidozė [1], danai tai pablogina ypač silpnai bazinių vaistų (pvz. doksorubicino) patekimą į gilesnius navikinius audinius [2-3]. Ribotas vaistų pasiskirstymas kietuose navikuose yra svarbi atsparumo vaistams priežastis. Protonų siurblio slopikliai gali padidinti ląstelių endosominį pH, ir tai gali padidinti vaisto pasiskirstymą kietuosiuose navikuose. Tai sudaro prielaidas tyrinėti protonų siurblio slopiklių poveikį doksorubicino ir jo pegiliuotos formos (PLD) skvarbai ląstelių kultūrose [4,5]. Tikslas Mūsų tyrimo tikslas buvo įvertinti lanzoprazolo įtaką doksorubicino ir PLD skvarbai į krūties vėžio linijos MCF-7 ląsteles. Metodai Doksorubicino ir PLD patekimas į ląsteles silpnai bazinėje (pH 7,2) ir rūgštinėje (pH 6,0) terpėse įvertintas fluorescencinės mikroskopijos metodu. Vertinant lanzoprazolo įtaką skvarbai, ląstelės juo inkubuotos 2 val. prieš įpilant doksorubicino arba PLD. Nuotraukos buvo analizuojamos ImageJ programa (Nacionalinis sveikatos institutas, JAV). Kiekvienoje nuotraukų grupėje išanalizuota mažiausiai 20 atsitiktinių ląstelių ir išmatuotas fluorescencijos intensyvumas ląstelės branduolyje ir visoje ląstelėje. Rezultatai Silpnai bazinėje terpėje (pH 7,2) doksorubicinas geriausiai prasiskverbė į ląstelių branduolius po 2 val. inkubacijos (fluorescencijos intesyvumas siekė 6,43 s.v.; p < 0,05), o vėliau jo kiekis reikšmingai nekito (fluorescencijos intesyvumas- 6,17 s.v.; p < 0,05). Rūgštinėje terpėje (pH 6,0) doksorubicino patekimas tiek į branduolį, tiek į ląstelę nuolat didėjo 4 val. inkubacijos laikotarpyje (fluorescencijos intensyvumas atitinkamai pakito nuo 0 iki 5,07 s.v.; p < 0,05). Prieš inkubaciją su doksorubicinu ląsteles paveikus lanzoprazolu, tiek silpnai bazinėje terpėje, tiek rūgštinėje terpėje doksorubicino[...]