Antineuroninių antikūnų reikšmė amiotrofinės lateralinės sklerozės etiopatogenezėje

Abstract

Netiesioginės imunofluorescencijos reakcija, imunoblotingo ir afininės chromotografijos metodikomis tyrėme 61 amiotrofine lateraline skleroze (ALS) sergantį ligonį ir 41 asmenį be neurologinės patologijos. Darbo tikslai: (1) ištirti antikūnus prieš neurono citoskeleto struktūrinius baltymus sergančiųjų ALS kraujo serume ir likvore, jų priklausomybę nuo susirgimo klinikinių formų; (2) nustatyti antikūnų ir baltyminio antigeno, prieš kurį jie nukreipti, biocheminę priklausomybę. Rezultatai: Netiesioginė imunofluorescencijos reakcija (NIR) buvo panaudota kaip skriningas, jos pagalba atrinkome tik teigiamai sureagavusius ( 2-jų ir 3-jų balų švytėjimas) sergančiųjų ALS kraujo serumo mėginius ir atitinkamai - neigiamai sureagavusius (nėra švytėjimo) kontrolinės grupės mėginius. Tokiu būdu toliau buvo tiriami 47 (77%) ALS pacientai ir 41 (85%) kontrolinės grupės asmuo. Skirtingai nei NIR metodika gauti rezultatai (77% sergančių ALS reakcija buvo teigiama ir 85% kontrolinės grupės asmenų buvo neigiama) analizuojant imunoblotingu ir sergančiųjų, ir kontrolinės grupės kraujo serumo mėginiai reagavo su nervinio audinio antigenų rinkiniu. Šiame plataus spektro antigenų rinkinyje išryškėja mažoriniai komponentai, esantys 150-200 kD, 70 kD ir 50kD. Gauti rezultatai parodė, kad sergančiųjų kraujo serume cirkuliuojantys antikūnai, nukreipti prieš 50 kD ir 70 kD molekulinės masės antigenus, priklauso Ig M klasei. Antikūnus prieš didelės molekulinės masės antigenus (150-200 kD), kaip sergančiųjų ALS, taip ir kontrolinės grupės sudaro abi imunoglobulinų klasės – Ig G ir Ig M. Tiriant imunoblotingu su šarmine fosfotaze gauti rezultatai rodo, kad antikūnai sergant ALS atakuoja fosfatinius citoskeleto fragmentus – fosfoepitopus, kurie susidaro dėl intensyvesnio citoskeleto baltymų fosforilinimo proceso. [...].