Flavonoidai slopina kasos vėžio patogenezėje dalyvaujančių kasos žvaigždinių ląstelių aktyvumą

Abstract

Kasos fibrozė vienas iš pagrindinių lėtinį pankreatitą charakterizuojančių veiksnių. Žinoma, kad kasos audinio fibrozės atsiradimui didelę įtaką turi žvaigždinės ląstelės (ŽL). Šios ląstelės dalyvauja kasos vėžio patogenezėje. Tikslas Išskirti žmogaus ŽL, ištirti jų gyvybingumą bei metabolinį aktyvumą. Nustatyti oksidacijos-redukcijos reakcijų pokyčius, ŽL veikiant skirtingomis etanolio koncentracijomis ir flavonoidais. Metodika ŽL išskirtos iš kasos audinio paimto operacijos metu. Paveikus etanoliu ir flavonoidais, nustatytas aktyvumo kitimas. MTT tyrimu vertintas ląstelių gyvybingumas, BrdU tyrimu - proliferacijos potencialas. Sintezės aktyvumo tyrimai atlikti, tiriant kolageno I ir fibronektino kiekį. Energetinio metabolizmo pokyčius analizavome naudodami deguonies (O2) suvartojimo greičio ir ATP kiekio tyrimus. Oksidacijos-redukcijos reakcijos vertintos matuojant aktyvius O2 junginius. Rezultatai Nustatėme, kad aktyvuojant ŽL, 0.5% etanolio koncentracija yra optimali. Keičiasi ląstelių forma, intensyvėja proliferacija (2.3 karto), aktyvinama funkcija (išskiriamas didesnis kiekis kolageno ir fibronektino). ŽL aktyvinant 0.5% koncentracijos etanoliu, 34% padidėja deguonies sunaudojimas mitochondrijose ir 27.5% daugiau pagaminama vandenilio peroksido. Etanoliu (0.5%) paveiktas ląsteles veikiant flavonoidais, ląstelių proliferacija sumažėjo 34%. Western blot metodika vertinant baltymų ekspresiją, nustatyta, kad 0.5% koncentracijos etanoliu paveiktas ląsteles, paveikus flavonoidais, kolageno I ekspresija nepakinta, tačiau ženkliai sumažėja fibronektino ekspresija. ELISA metodu tiriant į supernatantą išskiriamų baltymų koncentraciją, nustatyta 33% sumažėjusi fibronektino ir 18% sumažėjusi kolageno I koncentracija. Flavonoidais paveiktose ląstelės 78% sumažėjo O2 suvartojimas ir 42% ATP kiekis. Išdavos Žvaigždines ląsteles 48 val. [...].