Pirmasis Lietuvoje diagnozuotas Y chromosomos mikrodelecijos atvejis vyrui su sunkia oligospermija

Abstract

Straipsnyje aprašomi 36 metų nevaisingo vyro tyrimų rezultatai. Šeimos nevaisingumo trukmė 12 metų. Kliniškai jam nebuvo rasta jokios patologijos, FSH, LH ir testosteronas buvo normalūs. Spermos tyrime – sunki oligospermija. Prieš nukreipiant šeimą intracitoplazminei spermatozoido injekcijai, buvo atliktas Y chromosomos mikrodelecijų tyrimas. Paciento genominė DNR buvo išskirta iš periferinio kraujo leukocitų. Y chromosomos mikrodelecijų tyrimui buvo naudojamas reagentų rinkinys “Y chromosome Deletion Detection System, Version 1.1” (Promega, USA). Y chromosomos AZF regiono konkrečių DNR sekų pagausinimas buvo atliekamas polimerazinės grandininės reakcijos (PGR) metodu. Pagausinti DNR fragmentai buvo įvertinami, vykdant elektroforezę agarozės gelyje. Tiriamajam pacientui buvo nustatyta mikrodelecija, apimanti dalį AZFd sričių (DYS237, DYS236) ir tiriamas AZFc sritis (DAZ geno penkios sritys ir DYS240). Taigi, pirmą kartą Lietuvoje diagnozuota Y chromosomos mikrodelecija ir tuo būdu nustatyta nevaisingumo priežastis vyrui su sunkia oligospermija, parodanti taip pat ir riziką perduoti šį genetinį defektą vyriškos lyties palikuoniui, taikant dirbtinio apvaisinimo metodus. In the case report we present data of the investigation of 36 year old infertile patient with 12 year family infertility history. No clinical andrological abnormalities were detected. FSH, LH and testosterone concentration was normal. Semen analysis revealed severe oligospermia. Before sending the patient for intracytoplasmic sperm injection procedure, analysis for Y chromosome microdeletions was performed. For the molecular genetic analysis patient’s genomic DNA was prepared from peripheral blood lymphocytes. The commercial kit of reagents “Y chromosome Deletion Detection System, Version 1.1” (Promega, USA)” was used for detection of Y chromosome microdeletions. Amplification of the 18 fragments was performed in four multiplex PCR, according to the manufacturer’s recommended conditions. PCR products were resolved electrophoretically and visualised by ethidium bromide staining. Microdeletion in AZFc region (five DAZ loci and DYS240) and partial deletion in AZFd region (DYS237, DYS 236) was detected for the patient. This is the first patient in Lithuania for whom Y chromosome microdeletion as the cause of infertility was diagnosed and the risk to transfer this abnormality to his son during the assisted reproduction treatment detected.