Uždegimą slopinantis apocianino poveikis žarnyno epitelinėms ląstelėms

Abstract

Įvadas: Opinis kolitas (OK) - tai lėtinė uždegiminė žarnyno liga, pasireiškianti storosios žarnos gleivinės pažeidimais. Moksliniai tyrimai nustatė sudėtingą ligos atsiradimą nulemiančių vidinių, išorinių bei genetinių veiksnių sąveiką. Tačiau tiksli ligos etiopatogenezė nėra aiški. Genetiniai ir funkciniai tyrimai parodė, kad oksidacinį stresą sukeliantys reaktyvieji deguonies junginiai užima svarbų vaidmenį OK patogenezėje. 2007 metais J. Rioux su kolegomis identifikavo NCF4 (rs4821544) kaip vieną iš uždegiminių žarnyno ligų jautrumo genų. NCF4 koduoja p40phox baltymą atsakingą už fermento NADPH oksidazės aktyvumą bei reaktyvių deguonies junginių gamybą. NADPH oksidazės inhibitorius apocianinas (Apoc.) plačiai naudojamas moksliniuose tyrimuose, tačiau tikslus inhibicijos mechanizmas nenustatytas, manoma, kad jis blokuoja citoplazmoje esančių NADPH oksidazės subvienetų prisijungimą prie membraninių subvienetų. Tikslas ir uždaviniai: Išanalizuoti NADPH oksidazės inhibitoriaus Apoc. poveikį žarnyno epitelinėms ląstelėms uždegimo metu. 1. DSS kolito modelio įdiegimas; 2. Apoc. poveikio nustatymas žmogaus bei pelės žarnyno epitelinių ląstelių kultūrose; Metodika: Tyrimo objektas. Žmogaus bei pelių BALB/c linijos gaubtinės žarnos biopsijos. Tyrimo apimtis.Ūmus DSS kolitas - 3 pelytės. Kontrolinė grupė - 3 pelytės. Sergantys OK – 5 asmenys. Kontrolinės grupės – 3 asmenys. Metodika: Pelių DSS eksperimentinio modelio atlikimas. Pelių gaubtinės žarnos audinių histologinė analizė. Epitelinių žarnyno ląstelių išskyrimas EDTA metodu. Inkubavimas 24 h. mediatorių (lipopolisacharido (LPS), Apoc. bei LPS+Apoc.) poveikyje ir ląstelių gyvybingumo įvertinimas. Rezultatai: Tyrimo metu buvo įdiegtas pelių DSS kolito modelis bei atlikta histologinė analizė. Atlikus eksperimentus su žmogaus žarnyno epitelinėms ląstelėms.