Antiradikalinio ir redukcinio aktyvumo nustatymo metodai (apžvalga)
| Author | Affiliation | |
|---|---|---|
Lietuvos agrarinių ir miškų mokslų centro filialas Sodininkystės ir daržininkystės institutas | ||
Viškelis, Pranas | Lietuvos agrarinių ir miškų mokslų centro filialas Sodininkystės ir daržininkystės institutas |
| Date |
|---|
2012 |
Antioksidantas – tai medžiaga, kuri efektyviai redukuoja prooksidantą, sudarydama netoksiškus arba mažai toksiškus junginius. Didėja susidomėjimas augaluose aptinkamų natūralių antioksidantų apsauginėmis savybėmis ir jų taikymu profilaktiniams tikslams. Preliminarūs augalinių žaliavų antioksidantinio aktyvumo tyrimai atliekami in vitro analitiniais metodais. Populiariausi elektronų perdavimu (SET) pagrįsti antioksidantinio aktyvumo tyrimo metodai yra DPPH radikalų ir ABTS radikalų-katijonų surišimo įvertinimas bei geležies (FRAP) ir vario (CUPRAC) jonų redukcijos antioksidantinės galios nustatymas. Dažniausiai taikoma spektrofotometrinė regimosios šviesos absorbcijos pokyčio detekcija. Tai paprastas, patikimas ir tinkamas metodas grynų junginių antioksidantinėms savybėms įvertinti bei struktūros-aktyvumo ryšiui nustatyti. Sudėtiniuose mišiniuose, tokiuose kaip augalinės žaliavos ekstraktai ir maisto bandiniai, spektrofotometriniu metodu nustatomas tik visų bandinyje esančių junginių suminis antioksidantinis aktyvumas ir negalima nustatyti atskirų komponentų bendroje antioksidantų sudėtyje. Didelės skiriamosios gebos tiesioginiais (on-line) metodais atliekama greita antioksidantiniu aktyvumu išsiskiriančių junginių atranka. Taikant šiuos metodus sujungiama efektyviosios skysčių chromatografijos (ESC) skirstymas ir pokolonėlinės reakcijos detekcija. ESC pokolonėliniais metodais įvertinamos atskirų junginių antioksidantinės savybės bei jų indėlis į bendrą kompleksinių mišinių antioksidantinį aktyvumą. Šiais metodais patikimai, tiksliai bei atkartojamai įvertinama augalinių žaliavų ekstraktų kokybė, nustatant biologiškai aktyvių junginių antioksidantinio aktyvumo kokybi-nius ir kiekybinius rodiklius. Jie leidžia kontroliuoti antioksidantų pasiskirstymą ir stabilumą, nustatyti optimalias žaliavos ar produkto saugojimo sąlygas. [...].
Antioxidant is a substance that effectively reduces pro-oxidant resulting in compounds with low or no toxicity. Interest in protective properties of natural antioxidants of plant origin and their application in prophylaxis is increasing. Preliminary researches on antioxidant activity of herbal raw materials are carried out by in vitro methods. The most popular methods based on single electron transfer (SET) are assessment of DPPH radical, ABTS radical-cation scavenging, ferric (FRAP) and cupric (CUPRAC) ion reducing antioxidant power. The most commonly, detection of change in spectrophotometric visual light absorption is used. It’s a simple, reliable and suitable method for evaluation of antioxidant properties of pure compounds and for identification of structure-activity relationship. In complex mixtures such as plant extracts and food matrixes spectrophotometric methods evaluate total antioxidant activity of all compounds present in a sample and cannot evaluate the contribution of separate compounds to overall activity. High-resolution online assays are used for a rapid separation of active antioxidant compounds. These assays combine HPLC separation and post-column reaction detection. HPLC post-column assays assess antioxidant properties of separate compounds and their contribution to the overall antioxidant activity of complex mixtures. HPLC post-column assays provide reliable, accurate and reproducible assessment of quality of plant extracts by determining markers of qualitative and quantitative antioxidant activity of biologically active compounds. Assays enable the control of distribution and stability of antioxidants and determination of optimal storage conditions of materials or preparations. HPLC post-column assays are effective means for plant selection among different species, varieties, phenological stage and growing conditions in order to ensure abundant antioxidant composition.