Options
Daržinių krokų (Crocus sativus L.) biologiškai aktyvių medžiagų tyrimas efektyviosios skysčių chromatografijos metodu
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos sekretorius / Committee Secretary | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member |
Tyrimo objektas ir metodai. Daržinių krokų purkos, kuokeliai, žiedlapiai, stiebai ir stiebagumbiai, surinkti 2018 metų spalio mėnesį VDU botanikos sode, Kaune; purkos, gautos iš tiekėjų, renkančių žaliavą Ukrainoje, Vokietijoje, Italijoje, Ispanijoje, Azerbaidžane, Irane, Maroke, Indijoje, Australijoje. Flavonoidų, fenolinių rūgščių bei krocino, šafranalio ir pikrokrocino kokybinis ir kiekybinis nustatymas vykdomas efektyviosios skysčių chromatografijos (ESC) metodu. Metodo validacijos parametrai įvertinami - specifiškumo, tiesiškumo, aptikimo ir nustatymo ribų, tikslumo, preciziškumo ir stabilumo aspektu. Darbo tikslas. Ištirti daržinių krokų (Crocus sativus L.) augalinės žaliavos biologiškai aktyvių medžiagų kokybinę ir kiekybinę sudėtį, taikant efektyviąją skysčių chromatografiją. Darbo uždaviniai. 1) Pritaikyti ir validuoti efektyviosios skysčių chromatografijos metodiką daržinių krokų (Crocus sativus L.) augaliniuose ekstraktuose esančioms biologiškai aktyvioms medžiagoms nustatyti. 2) ESC metodu įvertinti biologiškai aktyvių junginių kokybinę sudėtį įvairiose šalyse užaugintų daržinių krokų purkose. 3) Nustatyti biologiškai aktyvių junginių kokybinę sudėtį Lietuvoje užaugintų daržinių krokų kuokeliuose, žiedlapiuose, stiebuose ir stiebagumbiuose. 4) Taikant efektyviąją skysčių chromatografiją, atlikti identifikuotų daržinio kroko junginių kiekybinę analizę ir įvertinti junginių kiekio įvairavimą skirtingų šalių ėminiuose. Tyrimo rezultatai ir išvados. ESC metodu identifikuota ir kiekybiškai įvertinta 15 fenolinių junginių, iš jų 5 fenolinės rūgštys ir 10 flavonoidų, visuose purkų ėminiuose – krocinas, pikrokrocinas ir šafranalis. Kitose augalo dalyse dominuojantys junginiai buvo chlorogeno ir kofeino rūgštys bei apigenin-7-gliukozidas. Vyraujanti fenolinė rūgštis visose daržinio kroko purkose – ferulo rūgštis, flavonoidas – rutinas. Didžiausias kiekis daržinio kroko žaliavose (purkose) nustatytas – krocino (vidutiniškai 382,449 mg/g), mažiausias (kuokeliuose, stiebuose, žiedlapiuose) – t-cinamono r. (vidutiniškai 0,002 mg/g). Krocino, pikrokrocino ir šafranalio kiekis skirtingų šalių purkose varijuoja atitinkamai nuo 253,481 mg/g (purkose iš Lietuvos) iki 612,848 mg/g (purkose iš Italijos), nuo 54,905 mg/g (purkose iš Azerbaidžano) iki 242,447 mg/g (purkose iš Ispanijos) ir nuo 0,033 mg/g (purkose iš Lietuvos) iki 5,408 mg/g (purkose iš Australijos).
Object and methods of the study. Stigmas, stamens, petals, stems and tubers were collected in VDU botanical garden of Kaunas (Lithuania) in October 2018; stigmas also booked from other suppliers collecting raw materials from Ukraine, Germany, Italy, Spain, Azerbaijan, Iran, Morocco, India and Australia. Qualitative and quantitative analysis of flavonoids, phenolic acids, crocin, safranal and picrocrocin is carried out by HPLC. Validation parameters of method are evaluated in aspects of specificity, linearity, limits of detection and quantitation, accuracy, precision and stability. Aim of the study. Investigate qualitative and quantitative composition of biologically active substances of Crocus sativus L. vegetable raw material, using HPLC. Tasks of the study. 1) To apply and validate methodology of HPLC for determination of biologically active substances of Crocus sativus L. vegetable exracts. 2) To analyse qualitative composition of biologically active compounds of stigmas from various countries by method of HPLC. 3) To determine qualitative composition of biological active compounds of stamens, petals, stems and tubers of Crocus sativus L. grown in Lithuania. 4) To quantitate amounts of identified compounds in herb and to estimate the variation in the quantities of compounds in the samples from different countries. Results and conclusions of the study. By using HPLC were identified and quantitated 15 phenolic compounds, 5 of them were phenolic acids, 10 flavonoids and in all specimens of stigmas – crocin, picrocrocin and safranal. In other parts of plant predominant compounds were chlorogenic and caffeic acids and apigenin-7-glucoside. Dominant phenolic acid in stigmas of crocus sativus – ferulic acid, flavonoid – rutin. Largely in raw materials (stigmas) of Crocus sativus L. were determinated crocin (on average (382,449 mg/g), the lowest amount (in stamens, petals, stems) – t-cinamic acid (on average 0,002 mg/g). Crocin, picrocrocin and safranal quantity in stigmas of different countries vary from 253,481 ( in Lithuanian stigmas) to 612,848 mg/g ( in Ialian stigmas), from 54,905 (in Azerbaijan stigmas) to 242,447 mg/g (in Spain stigmas) and from 0,033 (in Lithuanian stigmas) to 5,408 mg/g (in Autralian stigmas), respectively.