Use this url to cite ETD: https://hdl.handle.net/20.500.12512/110612
Options
Smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių elgsenos ant viščiuko embriono chorioalantojinės membranos ypatumai bei ląstelių užsodinimo metodų vertinimas
Type of publication
type::text::thesis::master thesis
Title
Smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių elgsenos ant viščiuko embriono chorioalantojinės membranos ypatumai bei ląstelių užsodinimo metodų vertinimas
Other Title
Behaviour Characteristics of Small–Cell Lung Cancer Cells on Chick Embryo Chorioallantoic Membrane and Evaluation of Cell Seeding Techniques
Advisor
Other(s)
Recenzentas / Reviewer | |
Komisijos pirmininkas / Committee Chairman | |
Komisijos narys / Committee Member | |
Komisijos narys / Committee Member |
Extent
39 p.
Date Issued
2021-06-14
Abstract
Darbo autorė: Ieva Šmitaitė
Darbo pavadinimas: Smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių elgsenos ant viščiuko embriono chorioalantojinės membranos (CAM) ypatumai bei galimų ląstelių užsodinimo metodų vertinimas.
Darbo tikslas: Išanalizuoti mokslinę literatūrą apie smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių elgseną ant viščiuko embriono chorioalantojinės membranos (CAM) naudojant skirtingus ląstelių užsodinimo metodus.
Tyrimo uždaviniai: 1) Išanalizuoti mokslinę literatūrą apie smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių elgseną ant viščiuko embriono chorioalantojinės membranos (CAM). 2) Išanalizuoti mokslinę literatūrą apie skirtingus ląstelių užsodinimo ant CAM metodus ir juos palyginti. 3) Įvertinti chorioalantojinės membranos struktūros pokyčius naudojant skirtingus galimus ląstelių užsodinimo metodus ant CAM.
Darbo metodika: Apvaisinti vištų kiaušiniai (n꓿19) buvo inkubuoti 37,7 °C temperatūroje, santykinė oro drėgmė – 60 %. 7–tą tyrimo dieną ant embrionų CAM buvo užsodinta želatininė kempinėlė su arba be 20 μl kolageno. Dvyliktą dieną membrana buvo nuimta bei preparatas paruoštas mikroskopiniam vertinimui. Mikroskopinio tyrimo metu vertintas membranos storis bei kraujagyslių skaičius. Duomenys vertinti naudojant GraphPad Prism 8.4.3 statistinę programą.
Rezultatai: Nustatyta, kad tiek ant CAM užsodinta želatininė kempinėlė, tiek kempinėlė su 20 μl kolageno pritraukė kraujagysles, kurios išsidėstė kaip dviračio rato stipinai aplink kempinėles. Jau 3–čią užsodinimo parą matosi įaugimas į membranos sluoksnius. Vertinant membranas buvo gautas statistiškai reikšmingas skirtumas, kad CAM po želatinine kempinėle buvo 9 kartus storesnė už kontrolinę grupę (p<0,0001). Tuo tarpu membrana po kempinėle su 20 μl kolageno už kontrolinę grupę buvo storesnė 10,5 karto (p<0,0001). Tiek kempinėlė, tiek kempinėlė su 20 μl kolageno sukėlė didesnę CAM neoangiogenezę negu kontrolinėje grupėje (p=0,0025 ir p=0,0043 atitinkamai).
Išvados: 1) Smulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelės skatina CAM neoangiogenezę, membrana po ląstelėmis storėja. 2) Ex–ovo metodas tinkamas įvertinant vėžinių ląstelių įtaką platesniam CAM paviršiui, o norint silpnesnio medžiagos, naudojamos ląstelių užsodinimui, sukelto neoangiogeninio atsako, naudojama polivinilchloridas, poliuretanas, želatininė kempinėlė. 3) CAM storis po želatinine kempinėle būna 283,6±191,5 μm, po želatinine kempinėle su 20 μl kolageno būna 341,3±257,2 μm, stebima neoangiogenezė – želatininės kempinėlės grupėje susiformavo iki 80 naujų kraujagyslių, o želatininės kempinėlės su 20 μl kolageno grupėje iki 73 kraujagyslių.
Praktikinės rekomendacijos: Įvertinti, kad naudojant viščiuko embriono CAM metodą, sukelta neoangiogenezė ir CAM sustorėjimas gali įvykti dėl ląstelių užsodinimui naudojamų medžiagų.
Author: Ieva Šmitaitė
Title: Behaviour Characteristics of Small–Cell Lung Cancer Cells on Chick Embryo Chorioallantoic Membrane (CAM) and Evaluation of Different Cell Seeding Techniques
Aim: To analyse scientific literature about behaviour of different small–cell lung cancer cells on chick chorioallantoic membrane using different cell seeding techniques.
Objectives: 1) To analyse scientific literature about behaviour of small–cell lung cancer cells on chick embryo chorioallantoic membrane. 2) To analyse scientific literature about different cell seeding techniques on CAM and to compare them. 3) To analyse chick embryo CAM structural changes using different cell seeding techniques.
Research methodology: Fertilised chicken eggs (n꓿19) were incubated at 37,7oC and 60 % humidity. On the 7th day of the study, gelatin sponges with or without 20 μl of collagen were seeded on embryo CAM. On the 12th day membranes were removed ant prepared for microscopic evaluation. During microscopic evaluation thickness of membranes and their blood vessel count were measured. Data were analyzed with GraphPad Prism 8.4.3 program.
Results: It was determined that around gelatin sponge with or without 20 μl collagen blood vessels were arranged in a spoked–wheel manner. On the 3rd day of implantation, sponges started to grow into membrane. There was a statistically significant difference between control group and gelatin sponge group in the thickness of membranes – in the gelatin sponge group membranes were 9 times thicker (p<0,0001). In the gelatin sponge with 20 μl of collagen group membranes were 10,5 times thicker than control group (p<0,0001). Both gelatin sponges with and without 20 μl of collagen caused stronger neoangiogenesis then control group did (p=0,0025 and p=0,0043 respectively).
Conclusions: 1) Small–cell lung cancer cells increase CAM thickness and neoangiogenesis. 2) When analyzing what impact cancer cells have on a wider CAM surface, the best method to use is Ex–ovo. If it is important to have a minimal neoangiogenesis caused by a cell seeding material, then polyvinylchloride, polyurethane or gelatin sponge should be used. 3) CAM thickness under gelatin sponge is 283,6±191,5 μm and under gelatin sponge with 20 μl of collagen – 341,3±257,2 μm. At most 80 new vessels formed in gelatin sponge group, whereas in the gelatin sponge with 20 μl of collagen group, there were 73 new vessels at most.
Practical recommendations: Keep in mind that when using chick embryo chorioallantoic membrane model, neoangiogenesis and thickened CAM can be caused by a material used for cell seeding.
Publisher
Lietuvos sveikatos mokslų universitetas
Language
Lietuvių / Lithuanian (lt)
Defended
Taip / Yes
Access Rights
Atviroji prieiga / Open Access